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抗体的制备过程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物:常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定:得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存:抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
产品名称 | 癌胚抗原相关细胞粘附分子抗体 |
英文名称 | CD66c |
规格 | 0.1ml |
公司专业供应的抗体,抗体是用于化学反应、分析化验、研究实验、教学实验、化学配方使用的纯净化学品,产品品质,价格实惠,多种规格供应,售后完善。抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏*佐剂和弗氏不*佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
血清淀粉样蛋白A(SAA)总状共头霉拉丁属名: Syncephalastrum racemosum
热休克蛋白60(Hsp-60)Xanthomonas gardneri注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
热休克蛋白90(HSP-90)类干酪乳杆菌类干酪亚种拉丁属名: Lactobacillus paracasei subsp. paracasei
热休克蛋白70(HSP-70)蜡状芽孢杆菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
热休克蛋白40(HSP-40)烟曲霉拉丁属名: Aspergillus fumigatus
热休克蛋白20(HSP-20)禽劳斯肉瘤病毒拉丁属名: Avian Rous sarcoma virus
肌球蛋白(MYS)产气荚膜梭菌 毒素C型拉丁属名: perfringens Type C
C反应蛋白(CRP)木霉注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
固酮(ALD)枝孢属拉丁属名: Cladosporium sp.
肌红蛋白(MYO/MB)香菇拉丁属名: Lentinula edodes
心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)谢瓦曲霉拉丁属名: Aspergillus chevalieri
血管生长素(ANG)南极世宗菌拉丁属名: Sejongia antarctica
血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)传染性法氏囊病病毒拉丁属名: Infectious bursal disease virus
组织相容性2-K1-K 区(H2-K1)化妆品 金黄色葡萄球菌(阳性)拉丁属名: 化妆品 金黄色葡萄球菌(阳性)
甘露糖(MN) 葡萄座腔菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
甘露糖受体(MR) 产气荚膜梭菌 毒素A型拉丁属名: perfringens Type A
癌胚抗原相关细胞粘附分子抗体内收蛋白抗体Quercitrin 2''-O-arabiside中文名:别名:Quercetin 3-O-(2''-O-α-L-arabipyrasyl)-α-L-rhampyraside分子式:C26H28O15
脂肪组织分化相关蛋白抗体Volkensiflavone中文名:别名:分子式:C30H20O10
脂联素受体1抗体Mosloflavone中文名:5-羟基-6,7-二甲氧基黄酮别名:5-Hydroxy-6,7-dimethoxyflavone分子式:C17H14O5
肾上腺髓质素受体抗体5,6,7,4'-Tetramethoxyflavone中文名:5,6,7,4'-四甲氧基黄酮别名:Tetra-O-methylscularein; 4',5,6,7-Tetramethoxyflavone分子式:C19H18O6
脂联素抗体Eupalitin中文名:别名:3,5,4'-Trihydroxy-6,7-dimethoxyflavone分子式:C17H14O7