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抗体的制备过程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物:常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定:得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存:抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
产品名称 | 11号染色体开放阅读框67抗体 |
英文名称 | C11ORF67 |
规格 | 0.2ml |
公司专业供应的抗体,抗体是用于化学反应、分析化验、研究实验、教学实验、化学配方使用的纯净化学品,产品品质,价格实惠,多种规格供应,售后完善。抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏*佐剂和弗氏不*佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
普伐他汀标准品Human CCL20 ELISA Kit纯度:0.98
盐普莫卡因标准品Human CCL2 ELISA Kit纯度:0.999
磷定标准品Human CCL17 ELISA Kit纯度:0.999
红车轴提取物粉标准品Human CCL11 ELISA Kit纯度:0.999
水飞蓟提取物粉标准品Human CCL1 ELISA Kit纯度:0.998
卡瓦提取物粉标准品Human CCL1 ELISA Kit纯度:0.996
生姜粉标准品Human BAFF-R ELISA Kit纯度:0.991
Guinea pig interleukin 4,IL-4 ELISA Kit 豚鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒 进口/分装规格:96T/48T111753-200601含量测定表告依春规格:20mg
Guinea pig Immuglobulin G,IgG ELISA Kit豚鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒进口/原装规格:96T/48T111754-200601含量测定罗汉果苷Ⅴ规格:20mg
Guinea pig Lebtospira IgG ELISA Kit豚鼠钩端螺旋体IgG(Lebtospira)ELISA试剂盒*规格:96T/48T111755-200601含量测定20(S)-原人参三醇规格:20mg
Guinea pig leukotriene D4,LT-D4 ELISA Kit 豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA试剂盒 *规格:96T/48T111757-200601含量测定二基庚 A规格:20mg
Guinea pig ovalbumin specific IgE,OVA sIgE ELISA Kit豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA试剂盒进口/分装规格:96T/48T111760-200601含量测定11-羰基-β-酰香酸规格:20mg
Guinea pig Interleukin-12,IL-12/P70 ELISA Kit豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒 进口/原装规格:96T/48T111761-200601含量测定桃叶珊瑚苷规格:20mg
11号染色体开放阅读框67抗体人肾管状上皮细胞说明书黑粉菌属裸鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒
红螺菌属菌种裸鼠克拉拉细胞蛋白(CC16) ELISA试剂盒
啤酒酵母裸鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA试剂盒
茄病镰刀菌蓝色变种仓鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA试剂盒
胁状拟内孢霉仓鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒
须壳孢属仓鼠甲状腺结合球蛋白(TBG)ELISA试剂盒
芽枝孢霉属仓鼠组织蛋白酶K(cath-K)ELISA试剂盒
鼠伤寒沙门氏菌哥本哈根变种豚鼠卵清蛋白特异性IgG(OVA sIgG)ELISA试剂盒
肠炎沙门氏菌danysz 变种豚鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒
绵羊流产沙门氏菌豚鼠免疫球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒
伤寒沙门氏菌Ty21a,ga豚鼠钩端螺旋体IgG(Lebtospira)ELISA试剂盒
鸡沙门氏菌豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA试剂盒
鼠布氏菌豚鼠卵清蛋白特异性IgE(OVA sIgE)ELISA试剂盒
非洲分枝杆菌豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒
母牛分枝杆菌豚鼠一氧化氮(NO)ELISA试剂盒
肠炎沙门菌豚鼠主要组织相容性复合体(MHC/GPLA)