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抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏*佐剂和弗氏不*佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
公司专业供应的抗体,抗体是用于化学反应、分析化验、研究实验、教学实验、化学配方使用的纯净化学品,产品品质,价格实惠,多种规格供应,售后完善。
产品名称 | 卷曲螺旋结构域蛋白22抗体 |
英文名称 | CCDC22 |
规格 | 0.2ml |
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
抗体的制备过程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物:常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定:得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存:抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
非普拉宗英文名称:Feprazone保存:20℃,避光规格:50mg黑色素瘤相关抗原B1一抗
杨酰英文名称:Salicylamide保存:20℃,避光规格:100mg黑色素瘤相关抗原B3一抗
盐拉贝洛尔英文名称:Labetalol hydrochloride保存:20℃,避光规格:100mg黑色素瘤相关抗原B6一抗
盐吗啉胍英文名称:Moroxydine Hydrochloride保存:20℃,避光规格:100mg黑色素瘤相关抗原B2一抗
保泰松英文名称:Phenylbutazone保存:20℃,避光规格:100mg黑色素瘤相关抗原B4一抗
无水二钠英文名称:Two sodium hydrogen phosphate anhydrous保存:20℃,避光规格:100mg黑色素瘤相关抗原C1一抗
溴东莨菪英文名称:Scopolamine Methobromide保存:20℃,避光规格:50mg组蛋白酰转移酶一抗(脑膜瘤表达抗原5)
盐环仑特罗英文名称:Ring Lun clenbuterol hydrochloride保存:20℃,避光规格:50mg黑色素瘤相关抗原G1一抗(相关蛋白4)
盐妥洛特罗英文名称:Tulobuterol hydrochloride保存:20℃,避光规格:50mg黑色素瘤相关抗原C2一抗
溴肽林英文名称:Propantheline bromide保存:20℃,避光规格:50mg黑色素瘤抗原样基因2一抗
柠檬英文名称:Limonene保存:20℃,避光规格:200mg结核分枝杆菌Ag85B一抗
尿嘧啶英文名称:Uracil保存:20℃,避光规格:50mg膜相关环指蛋白11一抗
替加氟英文名称:Tegafur保存:20℃,避光规格:50mg化肌球蛋白轻链一抗
吗多明英文名称:Molsidomine保存:20℃,避光规格:100mg肌球蛋白轻链1/3一抗
加兰他敏英文名称:Galanthamine保存:20℃,避光规格:HPLC≥98% 20mg/支肌肉细胞特异性泛素蛋白连接酶1一抗
(+)儿茶素;儿茶素英文名称:(+) catechin; catechin保存:20℃,避光规格:HPLC≥98% 20mg/支泛素蛋白连接酶一抗
表儿茶素英文名称:Epicatechin保存:20℃,避光规格:HPLC≥98% 20mg/支锌指蛋白801一抗
卷曲螺旋结构域蛋白22抗体125mgBL21(DE3) 感受态细胞 18883-66-4155801-00-696T角蛋白18(KRT18)HPLC≥98%低分子质量蛋白7/β型蛋白酶体9检测试剂盒10mgNEP化学试剂Dachsous 1蛋白(DCHS1)25mgBL21(DE3)感受态细胞 18883-66-496T细胞外质糖蛋白(MEPE)HPLC≥98%登革热抗体IgM检测试剂盒10mgTU M2-PK化学试剂D2-羟二二酯脱酶(D2HGDH)
25mgBL21(DE3)感受态细胞 18883-66-496T细胞外质糖蛋白(MEPE)HPLC≥98%登革热抗体IgM检测试剂盒10mgTU M2-PK化学试剂D2-羟二二酯脱酶(D2HGDH)200mgBL21(DE3)pLysS受体菌64-75-5155521-46-396T周期素依赖性激酶4(CDK4)HPLC≥98%登革热抗体检测试剂盒10mgCA724化学试剂糖转移酶14(CHST14)
200mgBL21(DE3)pLysS受体菌64-75-5155521-46-396T周期素依赖性激酶4(CDK4)HPLC≥98%登革热抗体检测试剂盒10mgCA724化学试剂糖转移酶14(CHST14)200mgBL21(DE3)pLysS 感受态细胞 64-75-520380-11-496T杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)HPLC≥98%登革热检测试剂盒20mgCTA化学试剂Cystin 1蛋白(CYS1)
200mgBL21(DE3)pLysS 感受态细胞 64-75-520380-11-496T杀菌性/通透性增加蛋白(BPI)HPLC≥98%登革热检测试剂盒20mgCTA化学试剂Cystin 1蛋白(CYS1)200mgBL21(DE3)pLysS 感受态细胞 64-75-573493-60-496T毒蕈型胆受体M5(CHRM5)HPLC≥98%的牛血清白蛋白检测试剂盒10mgTNF-α化学试剂Cylicin 2蛋白(CYLC2)
200mgBL21(DE3)pLysS 感受态细胞 64-75-573493-60-496T毒蕈型胆受体M5(CHRM5)HPLC≥98%的牛血清白蛋白检测试剂盒10mgTNF-α化学试剂Cylicin 2蛋白(CYLC2)15mgX-gal(20mg/mL)64-75-5943989-68-296T纤溶酶原(Plg)HPLC≥98%蛋白质二键异构酶检测试剂盒20mgTNFAIP6化学试剂Cylicin 1蛋白(CYLC1)