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公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点,咨询并订购!
产品名称 | 规格 | 货号 |
RNase A | 1ml | FS-R7430 |
产品分类:RNA溶液
储存条件:—20℃,12个月
用途:去除RNA
注意事项:主要由RNase A、Tris-HCL、氯化钠组成,未加热灭活,含有极少量DNase。
配制与标定的实验原理:
1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一种白色晶体粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室温溶解度为0.02g/100g H2O。
2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂,基准试剂的预处理:称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层,然后用水洗净,烘干。
配制步骤:
1、取适量锌片放在100mL烧杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自来水、纯水洗净,烘干、冷却。
2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15~0.2g Zn,盖好小表面皿。
3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地将溶液转移至250mL容量瓶中,用纯水稀释至标线,摇匀。
实验方法与判定:
1.对照品溶液的稳定性
2.对照品溶液的配制:精密量取脑对照品适量,加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液,作为对照品溶液。
3.色谱条件:以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱;柱温120℃;进样口温度250℃;检测器温度250℃;分流进样,分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。
4.实验方法:配制的对照品溶液,一份置冷处保存,一份置室温中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液,三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法,并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来,保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%,验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。
溶血不动杆菌基因型4神经元2抗体Human GH(Growth Hormone) ELISA Kit骨织(Ostn)
灰腐质霉抑癌基因NDRG3抗体Human GM-CSF(Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor) ELISA Kit骨粘连蛋白(ON)
地霉半乳糖酵母有丝分裂氧化1抗体Human GDNF(Glial cell line-derived neurotrophic factor) ELISA Kit骨形成蛋白7(BMP7)
德氏乳杆菌保加亚亚种NADPH oxidase 3抗体Human IGF-2(Insulin-like growth factor II) ELISA Kit骨形成蛋白6(BMP-6)
明苏达被毛孢NADPH氧化NOX家族的成员4抗体Human GH(Growth Hormone) ELISA Kit骨形成蛋白4(BMP4)
Novosphingobium panipatense分裂周期相关蛋白1抗体Human Gp130/IL6ST(Interleukin-6 receptor subunit beta) ELISA Kit骨形成蛋白15(BMP15)
杂色曲霉NFAM1抗体Human GM-CSF(Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor) ELISA Kit骨形成蛋白(BMPs)
酿酒酵母环指蛋白67抗体Human GNLY(Granulysin) ELISA Kit骨涎蛋白(BSP)
中国毛霉神经母瘤抑瘤蛋白1抗体Human IL-18R1/IL-18R(Interleukin-18 receptor 1) ELISA Kit骨退化特异标志物(CTX-2)
大肠埃希氏菌嗜中性粒胞浆因子1抗体Human IL-3(Interleukin 3) ELISA Kit骨特异性碱性磷B(ALP-B)
微黄八叠球菌线粒体复合物NDUFS3蛋白抗体Human IL-29(Interleukin 29) ELISA Kit骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)
韩国生孢八叠球菌雄激受体复合物相关蛋白/核受体相互作用蛋白抗体Human GzmB(Granzyme B) ELISA Kit骨桥(OPN)
贪噬菌属9号染色体开放阅读框156抗体Human HBEGF(Proheparin-binding EGF-like growth factor) ELISA Kit骨膜蛋白/成骨特异性因子2(POSTN)
红球菌核因子活化T胞浆蛋白3抗体Human HGF(Hepatocyte Growth Factor) ELISA Kit骨胶原交联(Cr)
季也蒙毕赤酵母干转录因子NANOGP8抗体Human IL-28A(Interleukin-28A) ELISA Kit骨碱性磷(BALP)
栖泥盐盐八叠球菌神经凋亡抑制蛋白抗体Human IL-33(Interleukin-33) ELISA Kit骨钙/骨谷蛋白(OT/BGP)
米曲霉Aspergillus│oryzae 质量规格:进分,Sigma74782,蛋白小于1%远志
ATCC9058=CBS2021=IFO0566=CCRC20862=NRRLY-488资源名称: 季也蒙毕赤酵母 质量规格:进分,Sigma31149,蛋白小于5%异欧前胡
皮落青霉Penicillium│crustosum 质量规格:98%,进分欧前胡
RNase APROG(Mouse Progesterone)ELISA Kit 小鼠孕激su/孕tong规格: 48T
sRANKL(Mouse soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand)ELISA Kit 小鼠可溶性核因子κB受体活化因子配基规格: 48T
CT(Mouse Calcitonin)ELISA Kit 小鼠降钙su规格: 48T
ET-1(Mouse Endothelin 1)ELISA Kit 小鼠内皮su1规格: 48T
E2(Mouse Estradiol)ELISA Kit 小鼠雌二chun规格: 48T
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。