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产品分类：RNA溶液

储存条件：—20℃,12个月

用途：是巯基化DNA的还原剂和去保护剂,可以用于还原蛋白质中二硫键。

注意事项：无菌溶液,经过滤除菌处理。Dithiothreitol简称DTT,是一种小分子有机还原剂,其还原状态下为线性分子,被氧化后变为包含二硫键的六元环状结构。

配制与标定的实验原理：

1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一种白色晶体粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室温溶解度为0.02g/100g H2O。

2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂，基准试剂的预处理：称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层，然后用水洗净，烘干。

配制步骤：

1、取适量锌片放在100mL烧杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自来水、纯水洗净，烘干、冷却。

2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15～0.2g Zn，盖好小表面皿。

3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地将溶液转移至250mL容量瓶中，用纯水稀释至标线，摇匀。

实验方法与判定：

1.对照品溶液的稳定性

2.对照品溶液的配制：精密量取脑对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液，作为对照品溶液。

3.色谱条件：以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱；柱温120℃；进样口温度250℃；检测器温度250℃；分流进样，分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。

4.实验方法：配制的对照品溶液，一份置冷处保存，一份置室温中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液，三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法，并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来，保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%，验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。

嗜热链球菌磷化谷受体1抗体Human MMP-9(Matrix Metalloproteinase 9) ELISA Kit红生成受体(EPOR)

Aquibacillus halophilus磷化谷受体1抗体Human MYD88(Myeloid differentiation primary response protein MyD88) ELISA Kit红生成(EPO)

角鳞灰鹅膏菌神经束蛋白186抗体Human KLK10/NES1(Kallikrein-10) ELISA Kit红膜蛋白(EMP)

镰孢菌磷化泛连接NEDD4-2抗体Human NGF/NGFβ(Beta-nerve growth factor) ELISA Kit红激因子(ESF)

泡囊短波单胞菌磷化核因子p50/k基因结合核因子抗体Human NID-1(Nidogen-1/Entactin) ELISA Kit横纹肌辅肌动蛋白α(sm Actinin-α)

溜曲霉磷化谷受体1抗体Human MFGE8(Lactadherin) ELISA Kit亨廷顿相关蛋白1(HAP1)

酵母菌类固受体激活蛋白2抗体Human MMP-9(Matrix Metalloproteinase 9) ELISA Kit黑瘤衍生亮链额外核因子(MLZE)

紧密青霉胚胎干关键蛋白抗体Human MYD88(Myeloid differentiation primary response protein MyD88) ELISA Kit黑色抗体(MC Ab)

枯草芽孢杆菌核小体组装蛋白1抗体Human Mer/MERTK(Tyrosine-protein kinase Mer) ELISA Kit黑色激(MSH)

葡萄座腔菌N-钙粘附分子抗体Human KLK10/NES1(Kallikrein-10) ELISA Kit黑色浓缩激(MCH)

酿酒酵母核受体辅助抑制因子1抗体Human PIM-1(Serine/Threonine-protein Kinase Pim-1) ELISA Kit黑色瘤转移表面黏附分子(MMSAM)

单色革盖菌肾小球粘附分子受体抗体Human C-ERC(Mesothelin) ELISA Kit黑色瘤相关抗原D4(MAGED4/MAGED4B)

盐古杆菌巢蛋白/神经上皮干蛋白抗体Human KLK6(Kallikrein-6) ELISA Kit黑色瘤活性抑制蛋白(MIA)

蒂莫内马赛菌巢蛋白/神经上皮干蛋白抗体Human SERPINA4(Kallistatin) ELISA Kit黑色瘤标记物(MART/Melan-A)

黑芝蛋白激锚定蛋白抗体Human KIM-1(Kidney Injury Molecule 1) ELISA Kit核转录因子κBp65(NFκBp65)

枯草芽孢杆菌丝或半胱蛋白水解抑制蛋白1抗体Human SCFR/c-Kit(Stem Cell Factor Receptor) ELISA Kit核转录因子κB(NFκB)

同温层芽孢杆菌Bacillus│stratosphericus 质量规格：>99%,BR，可用于培养大黄

海绵假单胞菌Pseudomonas│pachastrellae 质量规格：HPLC>98%,标准品大黄

蜡样芽孢杆菌Bacillus│cereus 质量规格：>98%,BR大黄
DTT溶液Amylin(Mouse Amylin) ELISA Kit  小鼠胰淀su规格： 48T

Free-T3(Mouse Free Tri-iodothyronine Indes) ELISA Kit  小鼠游离三碘jia状腺原氨suan规格： 48T

LTC4(Mouse Leukotriene C4) ELISA Kit  小鼠白三烯C4规格： 48T

Cyt-C(Mouse Cytochrome-C) ELISA Kit  小鼠细胞色suC规格： 48T

FT4(Mouse Free Thyroxine) ELISA Kit  小鼠游离jia状腺su规格： 48T

使用方法：

1.  常用筛选浓度

注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线（kill curve），即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。

一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL；细菌/植物细胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 杀灭曲线的建立

注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线（剂量反应曲线）来实现，至少选择5个浓度。

1）  第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜；注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。

2）  根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。

3）  第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。

4）  接下来每3-4天更换新的含药物培养基。

5）  按照固定的周期（如每2天）进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数（通常是7-10天）内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

3.   稳定转染细胞的筛选

1）  转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞（直接传代或者稀释后传代）。

注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%

2）  每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。

3）  筛选7天后观察并评估细胞克隆（集落）的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。

4）   挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5）   之后更换正常培养基培养即可。