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公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点,咨询并订购!
产品名称 | 规格 | 货号 |
髓鞘染色液 | 3×50ml | FS-R6990 |
产品分类:神经染色
储存条件:室温,避光,12个月
用途:髓鞘染色,石蜡切片
注意事项:染色结果为:髓鞘呈深绿色,脱髓鞘纤维不着色。
配制与标定的实验原理:
1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一种白色晶体粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室温溶解度为0.02g/100g H2O。
2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂,基准试剂的预处理:称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层,然后用水洗净,烘干。
配制步骤:
1、取适量锌片放在100mL烧杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自来水、纯水洗净,烘干、冷却。
2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15~0.2g Zn,盖好小表面皿。
3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地将溶液转移至250mL容量瓶中,用纯水稀释至标线,摇匀。
实验方法与判定:
1.对照品溶液的稳定性
2.对照品溶液的配制:精密量取脑对照品适量,加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液,作为对照品溶液。
3.色谱条件:以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱;柱温120℃;进样口温度250℃;检测器温度250℃;分流进样,分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。
4.实验方法:配制的对照品溶液,一份置冷处保存,一份置室温中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液,三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法,并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来,保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%,验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。
短小芽孢杆菌9号染色体开放阅读框91抗体Human FBXW4(F-box and WD repeat domain containing 4) ELISA Kit兔子载脂蛋白B48(apo-B48)免疫试剂盒
Vagococcus sp.9号染色体开放阅读框93抗体Human FBXO18 ELISA Kit兔子孕激/孕(PROG)免疫试剂盒
杨树细盾霉9号染色体开放阅读框96抗体Human FBXW5 ELISA Kit兔子游离脂肪(FFA)免疫试剂盒
假单胞菌9号染色体开放阅读框98抗体Human FBXW7 ELISA Kit兔子硬骨(SOST)免疫试剂盒
竹荪属分裂周期蛋白5样蛋白抗体Human FBXO22 ELISA Kit兔子胰高血糖(GC)免疫试剂盒
球孢白僵菌钙粘蛋白23抗体Human FCHSD1 ELISA Kit兔子胰岛样生长因子2(IGF-2)免疫试剂盒
松生拟层孔菌色p450 2s1抗体Human FCRLB ELISA Kit兔子胰岛样生长因子1(IGF-1)免疫试剂盒
香菇7角蛋白16抗体Human FBXO28 ELISA Kit兔子胰岛(INS)免疫试剂盒
简青霉半胱蛋白蛋白-6抗体Human FMNL1 ELISA Kit兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)免疫试剂盒
土生丛毛单胞菌c-fos抗体Human FMR1NB ELISA Kit兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)免疫试剂盒
暗产色链霉菌9号染色体开放阅读框23抗体Human FKBP6 ELISA Kit兔子血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)免疫试剂盒
扁菌9号染色体开放阅读框25抗体Human FKBP3 ELISA Kit兔子血小板衍生生长因子AA(PDGF-AA)免疫试剂盒
灵芝属9号染色体开放阅读框30抗体Human FKBP7 ELISA Kit兔子血小板活化因子(PAF)免疫试剂盒
里亚氏须腹菌9号染色体开放阅读框37抗体Human FKBP2 ELISA Kit兔子血纤蛋白原降解产物(FDP)免疫试剂盒
Pedobacter9号染色体开放阅读框40抗体Human FKBP9 ELISA Kit兔子血栓调节蛋白(TM)免疫试剂盒
大肠埃希氏菌9号染色体开放阅读框41抗体Human FBXO3 ELISA Kit兔子血管紧张1-7(Ang1-7)免疫试剂盒
绿产色链霉菌Streptomyces│viridochromogenes 质量规格:>98%,BRv-rel禽网状内皮过多症病癌基因同源物B试剂盒霹雳萝芙木碱
越南芽孢杆菌Bacillus│vietnamensis 质量规格:>98%,BRvav3鸟核苷交换因子试剂盒蒲公英赛
小单孢菌属Micromonospora│sp. 质量规格:>99%,BRU型肌激,线粒体试剂盒哌异黄
髓鞘染色液RV Ag(Human Rotavirus antigen) ELISA Kit 人轮状病毒抗原规格: 48T
LP Ag(Human Legionella pneumophila antigen) ELISA Kit 人军团jun抗原规格: 48T
Human colicin ELISA Kit 人大肠junsu规格: 48T
ADV-Ag(Human Adenovirus Antigen) ELISA Kit 人腺病毒抗原规格: 48T
Human Trichinella antibody ELISA Kit 人旋毛虫规格: 48T
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。