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公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点,咨询并订购!
产品名称 | 规格 | 货号 |
Tris-硼酸电泳粉剂 | 1L | FS-R7307 |
产品分类:核酸电泳
储存条件:室温,24个月
用途:电泳缓冲液,常用于DNA凝胶电泳
注意事项:主要由Tris、硼酸、EDTA、DEPC处理水组成。
配制与标定的实验原理:
1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一种白色晶体粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室温溶解度为0.02g/100g H2O。
2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂,基准试剂的预处理:称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层,然后用水洗净,烘干。
配制步骤:
1、取适量锌片放在100mL烧杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自来水、纯水洗净,烘干、冷却。
2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15~0.2g Zn,盖好小表面皿。
3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地将溶液转移至250mL容量瓶中,用纯水稀释至标线,摇匀。
实验方法与判定:
1.对照品溶液的稳定性
2.对照品溶液的配制:精密量取脑对照品适量,加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液,作为对照品溶液。
3.色谱条件:以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱;柱温120℃;进样口温度250℃;检测器温度250℃;分流进样,分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。
4.实验方法:配制的对照品溶液,一份置冷处保存,一份置室温中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液,三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法,并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来,保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%,验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。
褶缘黑点口蘑整合β6/Integrin β6抗体Human RSK3 ELISA Kit鱼胰岛受体(ISR)免疫试剂盒
拟青霉磷肌磷蛋白INPP5抗体Human RSL24D1 ELISA Kit鱼胰岛(INS)免疫试剂盒
酿酒酵母白介4诱导蛋白1抗体Human RRP9 ELISA Kit鱼血管紧张转化(ACE)免疫试剂盒
苛求芽孢杆菌分化相关基因2蛋白/立即早期反应蛋白抗体Human RTF1 ELISA Kit鱼雄烯二(ASD)免疫试剂盒
长柄链格孢间粘附分子4抗体Human RRS1 ELISA Kit鱼色C氧化(COX)免疫试剂盒
冷温木克酵母整联蛋白重复蛋白3抗体Human RSK2 ELISA Kit鱼脱氢表雄(DHEA)免疫试剂盒
泗川假黄单胞菌胰岛样生长因子ⅡmRNA结合蛋白1抗体Human RSF1 ELISA Kit鱼褪黑(MT)免疫试剂盒
枯草芽孢杆菌胰岛样生长因子ⅡmRNA结合蛋白2抗体Human RARB(Retinoic acid receptor beta) ELISA Kit鱼透明质(HA)免疫试剂盒
坚强芽孢杆菌磷化整合β4抗体Human RSK3 ELISA Kit鱼嗜性粒过氧化物(EPX)免疫试剂盒
植物乳杆菌胰岛样生长因子结合蛋白1抗体Human RSL24D1 ELISA Kit鱼生长激(GH)免疫试剂盒
炭球菌胰岛样生长因子结合蛋白4抗体Human RSPH3 ELISA Kit鱼肾上腺髓质(ADM)免疫试剂盒
固氮假单胞菌整合α7抗体Human RSK2 ELISA Kit鱼肾上腺(EPI)免疫试剂盒
酿酒酵母白介7抗体Human RSPH9 ELISA Kit鱼神经肽Y(NPY)免疫试剂盒
地衣芽孢杆菌白介6受体α/IL-6Rα抗体Human RSL24D1 ELISA Kit鱼溶菌(肾淀粉样变)(LZM)免疫试剂盒
粪产碱杆菌白介9抗体Human RSK3 ELISA Kit鱼热休克蛋白HSP90α(HSP90AA1)免疫试剂盒
大肠埃希氏菌(大肠杆菌)*整合αL抗体Integrin αLHuman RARB(Retinoic acid receptor beta) ELISA Kit鱼热休克蛋白90(HSP-90)免疫试剂盒
蒲青霉Penicillium│lilacinum 质量规格:分析标准品,99.5%L-4-羟基异亮
大肠埃希氏菌Escherichia│coli 质量规格:100μg/ml,u=2%草乌
细脚棒束孢Isaria│tenuipes 质量规格:10μg/ml,u=2%圣草
Tris-硼酸电泳粉剂MMP- ELISA kit 大鼠基质金属蛋白mei规格: 48T
MMP-13 ELISA kit 大鼠基质金属蛋白mei13规格: 48T
MMP-3 ELISA kit 大鼠基质金属蛋白mei3规格: 48T
MMP-7 ELISA kit 大鼠基质金属蛋白mei7规格: 48T
MMP-2/Gelatinase A ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白mei2/明胶meiA规格: 48T
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。