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公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点,咨询并订购!
产品名称 | 规格 | 货号 |
Masson-Fontana黑色素染色液 | 3×50ml | FS-R6984 |
产品分类:色素染色
储存条件:4℃,避光,3个月
用途:黑色素染色,显示黑色素颗粒
注意事项:主要由氨银溶液、海波溶液、中性红溶液等组成。黑色素、嗜银素呈黑色,细胞核呈红色。
配制与标定的实验原理:
1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一种白色晶体粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室温溶解度为0.02g/100g H2O。
2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂,基准试剂的预处理:称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层,然后用水洗净,烘干。
配制步骤:
1、取适量锌片放在100mL烧杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自来水、纯水洗净,烘干、冷却。
2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15~0.2g Zn,盖好小表面皿。
3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地将溶液转移至250mL容量瓶中,用纯水稀释至标线,摇匀。
实验方法与判定:
1.对照品溶液的稳定性
2.对照品溶液的配制:精密量取脑对照品适量,加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液,作为对照品溶液。
3.色谱条件:以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱;柱温120℃;进样口温度250℃;检测器温度250℃;分流进样,分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。
4.实验方法:配制的对照品溶液,一份置冷处保存,一份置室温中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液,三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法,并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来,保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%,验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。
成晶节杆菌促凋亡调节蛋白BNIP3抗体Human FUT11 ELISA Kit小鼠17羟皮质类固(17-OHCS)免疫试剂盒
Phoma medicaginis var. medicaginis骨形态发生蛋白2受体抗体Human FUT4 ELISA Kit小鼠17-α甲睾(17-αMT)免疫试剂盒
腐皮镰孢马特变种甲状腺激受体共激活蛋白抗体Human FUT7 ELISA Kit小鼠16α羟基雌1(16-α OHE-1)免疫试剂盒
热球状尿芽孢杆菌磷化促凋亡Bik蛋白抗体Human FUT8 ELISA Kit小鼠15脂加氧(15-LO/LOX)免疫试剂盒
化妆品检测用蛋白酪激BAP135抗体Human FUT9 ELISA Kit小鼠12羟二十烷四烯(12-HETE)免疫试剂盒
热吸水链霉菌磷化相关死亡促进因子抗体Human FUT7 ELISA Kit小鼠1,4,5-三磷肌(IP3)免疫试剂盒
酿酒酵母磷化Bax抗体Human FRZB ELISA Kit小鼠1,3-βD葡葡糖苷(1,3-βD-Glu)免疫试剂盒
猪丹丝菌Bcl-10抗体Human FSD1L ELISA Kit小鼠1,25二羟基维生D3(1,25 DHVD3)免疫试剂盒
橄榄灰链霉菌原癌基因Bcl-6抗体Human FUT4 ELISA Kit豚鼠
链霉菌磷化Bcl-10抗体Human FSCN3 ELISA Kit豚鼠组(HIS)免疫试剂盒
副猪嗜血杆菌磷化死亡调解子抗体Human FSD2 ELISA Kit豚鼠转化生长因子β1(TGF-β1)免疫试剂盒
大肠埃希氏菌磷化B-Raf抗体Human FTCD ELISA Kit豚鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)免疫试剂盒
VPI 6883 布氏瘤胃球菌磷化癌易感基因1抗体Human FOXS1 ELISA Kit豚鼠孕激(progestogen)免疫试剂盒
双孢蘑菇芳香烃受体核转录蛋白样1抗体Human FRAG1 ELISA Kit豚鼠乙型肝炎病表面抗原(HBsAg)免疫试剂盒
球孢白僵菌癌易感基因复合物亚基蛋白3抗体Human FPGT ELISA Kit豚鼠乙型肝炎病表面抗体(HBsAb)免疫试剂盒
盐古杆菌肿瘤转移抑制蛋白BAMBI抗体Human Frizzled 2 ELISA Kit豚鼠血清淀粉样蛋白A(SAA)免疫试剂盒
深海微小杆菌Exiguobacterium│profundum 质量规格:>99%,BRα淀粉试剂盒去氢吴茱萸碱
聚多曲霉Aspergillus│sydowii (Bainier & Sartory) Thom & Church 质量规格:>98%,BRα半乳糖基试剂盒青霉
粪肠球菌Enterococcus│faecalis 质量规格:>98%,BRα半乳糖苷试剂盒千金子甾
Masson-Fontana黑色素染色液PIV IgM(Human parainfluenza virus IgM antibody) ELISA Kit 人抗副流感病毒IgM规格: 48T
HDV(Human hepatitis D virus antibody) ELISA Kit 人抗丁型肝炎病毒规格: 48T
Human HCV ELISA Kit 人抗丙型肝炎病毒规格: 48T
Human typhus antibody ELISA Kit 人抗斑疹伤寒规格: 48T
LLO(Human listeriolysin O) ELISA Kit 人单核细胞增多性李斯特junsuO规格: 48T
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。