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公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点,咨询并订购!
产品名称 | 规格 | 货号 |
自由醛基清除液 | 500ml | FS-R7168 |
产品分类:染色其他
储存条件:4℃,12个月
用途:洗脱电镜固定液的缓冲液,用于清洗固定后的标本,出去残留的自由醛基。标本经醛类固定剂固定后一般都残留有自由醛基,这种自由醛基比较活泼,可与各种抗体的氨基结合,导致难以清除的非特异性染色,因此标本固定后必须*清洗干净。
注意事项:由PBS、甘氨酸等组成。
配制与标定的实验原理:
1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一种白色晶体粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室温溶解度为0.02g/100g H2O。
2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂,基准试剂的预处理:称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层,然后用水洗净,烘干。
配制步骤:
1、取适量锌片放在100mL烧杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自来水、纯水洗净,烘干、冷却。
2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15~0.2g Zn,盖好小表面皿。
3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地将溶液转移至250mL容量瓶中,用纯水稀释至标线,摇匀。
实验方法与判定:
1.对照品溶液的稳定性
2.对照品溶液的配制:精密量取脑对照品适量,加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液,作为对照品溶液。
3.色谱条件:以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱;柱温120℃;进样口温度250℃;检测器温度250℃;分流进样,分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。
4.实验方法:配制的对照品溶液,一份置冷处保存,一份置室温中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液,三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法,并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来,保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%,验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。
冷温木克酵母磷化表皮生长因子受体抗体Human KLKB1 (Plasma kallikrein) ELISA KIT人16α羟基雌1(16-α OHE-1)免疫试剂盒
氏蜜环菌磷化埃兹蛋白抗体Human TTPA(Alpha-tocopherol transfer protein) ELISA Kit人15-羟基前列腺脱氢(15-PGDH)免疫试剂盒
菊异茎点霉磷化埃兹蛋白抗体Human IQUB (IQ and ubiquitin-like domain-containing protein) ELISA KIT人15-epi-氧脂 A4(15-epi-LXA4)免疫试剂盒
白色金针菇磷化转录因子ELK1抗体Human HCRTR2 (Orexin receptor type 2) ELISA KIT人14-3-3 蛋白 beta/alpha(YWHAB)免疫试剂盒
鸡伤菌磷化酪蛋白激A2受体抗体Human IL1F10(Interleukin-1 family member 10) ELISA Kit人12-脂氧化/脂加氧(LOX-12)免疫试剂盒
深红Ephrin B抗体Human ISLR (Immunoglobulin superfamily containing leucine-rich repeat protein) ELISA KIT人12羟二十烷四烯(12-HETE)免疫试剂盒
尖孢镰孢磷化Ephrin B抗体Human IGFN1 (Immunoglobulin-like and fibronectin type III domain-containing protein 1) ELISA KIT人11-脱氧皮质免疫试剂盒
茶藨子葡萄座腔菌磷化Ephrin B抗体Human ADRA1A(Alpha-1A adrenergic receptor) ELISA Kit人11去氢血栓烷B2(11-DH-TXB2)免疫试剂盒
枯草芽孢杆菌磷化Ephrin B抗体Human IL1RL2 (Interleukin-1 receptor-like 2) ELISA Kit人11β羟类固脱氢1型(11β-HSD1)免疫试剂盒
奇异链霉菌磷化Ephrin B抗体Human ICOSLG (ICOS ligand) ELISA KIT人1,5-脱水葡萄糖/1,5-脱水山梨(1,5-AG)免疫试剂盒
芽孢杆菌属磷化雌激受体α抗体Human Anti-M3 AChR (Anti-M3 Acetylcholine Receptor Antibody) ELISA Kit人1,4,5-三磷肌(IP3)免疫试剂盒
酿酒酵母磷化雌激受体α抗体Human IKBIP (Inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase-interacting protein) ELISA KIT人1,3-二磷甘油(1,3-DPG)免疫试剂盒
球孢白僵菌表皮生长因子受体底物8抗体Human HAGHL (Hydroxyacylglutathione hydrolase-like protein) ELISA KIT人1,25二羟基维生D3(1,25 DHVD3)免疫试剂盒
灰黄浅黄酵母内皮1抗体Human HYLS1 (Hydrolethalus syndrome protein 1 homolog) ELISA KIT人 Liprin alpha 1 免疫试剂盒
疮痂病链霉菌肠道病71型/手足口病病抗体Human IPMK (Inositol polyphosphate multikinase) ELISA KIT人 KIAA1199 免疫试剂盒
Corynebacterium sp.丝裂原活化蛋白激1抗体Human HCAR2 (Hydroxycarboxylic acid receptor 2) ELISA KIT犬
副猪嗜血杆菌Parasuis│Haemophilus 质量规格:分析标准品,98.5%棕榈酯
罗氏拟盘多毛孢Pestalotiopsis│lespedezae 质量规格:分析标准品,98%异香兰
黄柄曲霉Aspergillus│flavipes 质量规格:分析标准品,99.5%蔗糖
自由醛基清除液Human coagulation factor VIII related antigen,F VIII -Ag ELISA Kit 人Ⅷ相关抗原规格: 48T
Human coagulation factor IX ,F IX ELISA Kit 人Ⅸ规格: 48T
Human coagulation factor X ,F X ELISA Kit 人Ⅹ规格: 48T
Human von Willebrand Factor,vWF ELISA Kit 人血管性血友病因子/瑞斯托霉su辅因子规格: 48T
Human plasmin-antiplasmin complex,PAP ELISA Kit 人纤溶mei抗纤溶mei复合物规格: 48T
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。