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公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点,咨询并订购!
产品名称 | 规格 | 货号 |
亚硫酸氢钠溶液 | 500ml | FS-R7162 |
产品分类:染色其他
储存条件:室温,12个月
用途:清洗切片中多余的染色
注意事项:主要由亚硫酸氢钠、去离子水组成,注意密闭保存。
配制与标定的实验原理:
1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一种白色晶体粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室温溶解度为0.02g/100g H2O。
2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂,基准试剂的预处理:称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层,然后用水洗净,烘干。
配制步骤:
1、取适量锌片放在100mL烧杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自来水、纯水洗净,烘干、冷却。
2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15~0.2g Zn,盖好小表面皿。
3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地将溶液转移至250mL容量瓶中,用纯水稀释至标线,摇匀。
实验方法与判定:
1.对照品溶液的稳定性
2.对照品溶液的配制:精密量取脑对照品适量,加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液,作为对照品溶液。
3.色谱条件:以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱;柱温120℃;进样口温度250℃;检测器温度250℃;分流进样,分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。
4.实验方法:配制的对照品溶液,一份置冷处保存,一份置室温中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液,三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法,并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来,保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%,验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。
灰黄青霉DH5α大肠杆菌菌体蛋白抗体Human MSC(Musculin) ELISA Kit人B受体相关蛋白31(BCAP31)免疫试剂盒
谷棒杆菌磷化丝裂原活化蛋白激1/2抗体Human CENPU (Centromere protein U) ELISA KIT人B生长因子(BCGF)免疫试剂盒
酿酒酵母上皮粘附分子抗体Human MKL2 (MKL/myocardin-like protein 2) ELISA KIT人B淋巴瘤因子6(Bcl6)免疫试剂盒
香菇属酪蛋白激受体B2抗体Human MOAP1 (Modulator of apoptosis 1) ELISA KIT人B淋巴瘤-XL(Bcl-xl)免疫试剂盒
少孢酵母表皮生长因子抗体Human MAZ (Myc-associated zinc finger protein) ELISA KIT人B连接蛋白(BLNK)免疫试剂盒
*鸡油菌都不能订购表皮生长因子受体3抗体Human MOB2 (MOB kinase activator 2) ELISA KIT人B活化因子受体(BAFF-R)免疫试剂盒
突脐蠕孢菌酪蛋白激A4受体抗体Human MDGA1 (MAM domain-containing glycosylphosphatidylinositol anchor protein 1) ELISA KIT人B活化因子(BAFF)免疫试剂盒
雀黄链霉菌上皮钙粘附分子抗体Human MPHOSPH10 (U3 small nucleolar ribonucleoprotein protein MPP10) ELISA KIT人Bκ 轻肽基因增强子核因子抑制因子ε(NFKBIE)免疫试剂盒
链格孢红生成受体抗体Human PRX(Periaxin) ELISA Kit人B群链球菌多糖抗体(IgG)免疫试剂盒
克鲁斯假丝酵母脑啡肽抗体Human MKX(Homeobox protein Mohawk) ELISA Kit人B-淋巴趋化因子1(BLC-1/CXCL13)免疫试剂盒
杨齿白木层孔菌EID2蛋白抗体Human MARCO (Macrophage receptor MARCO) ELISA KIT人B淋巴抗原(CD20)免疫试剂盒
大肠杆菌上皮粘附分子抗体Human MST1R(Macrophage-stimulating protein receptor) ELISA Kit人blca-4 免疫试剂盒
淡紫拟青霉红膜相关蛋白ERMAP抗体Human M6PR (Cation-dependent mannose-6-phosphate receptor) ELISA KIT人blca-1 免疫试剂盒
菜豆间座壳腺样癌特异性相关抗原EMC1抗体Human SEMG1(Semenogelin-1) ELISA Kit人Bcl-2样蛋白1(BCL2L1)免疫试剂盒
拟粉红锁掷孢酵母腺样癌特异性相关抗原EMC1抗体Human MAD1L1(Mitotic arrest deficient 1-like protein 1) ELISA Kit人B7-H4 免疫试剂盒
斯氏梭菌硫软骨蛋白多糖3抗体Human M6PR (Cation-dependent mannose-6-phosphate receptor) ELISA KIT人A组链球菌菌壁多糖抗体(ASP)免疫试剂盒
绿色木霉Trichoderma│viride 质量规格:100μg/ml,u=3%华蟾酥基
荧光假单胞菌生物型FPseudomonas│fluorescens biotype F 质量规格:分析标准品木兰脂
多噬伯克霍尔德氏菌Burkholderia│multivorans 质量规格:分析标准品,≥99.5%(GC)异飞蓟宾
亚硫酸氢钠溶液PA-IgM(Human Platelet associated antibody) ELISA Kit 人血小板相关IgM规格: 48T
FPA(Human fibrinopeptide A) ELISA Kit 人血纤肽/纤维蛋白肽A规格: 48T
Plg(Human Plasminogen) ELISA Kit 人纤溶mei原规格: 48T
CTLA-4/CD152(Human cytotoxic T lymphocyte associated antigen 4) ELISA Kit 人细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4规格: 48T
Lambda -IgLC(Human lambda immunoglobulin light chain) ELISA Kit 轻链lambda规格: 48T
使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1) 第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2) 根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
3) 第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4) 接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5) 按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。
3. 稳定转染细胞的筛选
1) 转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%
2) 每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3) 筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4) 挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5) 之后更换正常培养基培养即可。