产品分类：细胞染色

储存条件：—20℃,避光,12个月

用途：流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡

注意事项：自备乙醇70%和PBS,流式细胞仪488nm处检测红色荧光

公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点，咨询并订购！

配制与标定的实验原理：

1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一种白色晶体粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室温溶解度为0.02g/100g H2O。

2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂，基准试剂的预处理：称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层，然后用水洗净，烘干。

配制步骤：

1、取适量锌片放在100mL烧杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自来水、纯水洗净，烘干、冷却。

2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15～0.2g Zn，盖好小表面皿。

3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地将溶液转移至250mL容量瓶中，用纯水稀释至标线，摇匀。

实验方法与判定：

1.对照品溶液的稳定性

2.对照品溶液的配制：精密量取脑对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液，作为对照品溶液。

3.色谱条件：以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱；柱温120℃；进样口温度250℃；检测器温度250℃；分流进样，分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。

4.实验方法：配制的对照品溶液，一份置冷处保存，一份置室温中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液，三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法，并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来，保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%，验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。

使用方法：

1.  常用筛选浓度

注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线（kill curve），即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。

一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL；细菌/植物细胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 杀灭曲线的建立

注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线（剂量反应曲线）来实现，至少选择5个浓度。

1）  第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜；注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。

2）  根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。

3）  第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。

4）  接下来每3-4天更换新的含药物培养基。

5）  按照固定的周期（如每2天）进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数（通常是7-10天）内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

3.   稳定转染细胞的筛选

1）  转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞（直接传代或者稀释后传代）。

注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%

2）  每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。

3）  筛选7天后观察并评估细胞克隆（集落）的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。

4）   挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5）   之后更换正常培养基培养即可。

葛根-6''-O-木糖苷 Basic Fuchsin促卵泡激抗体包装1g

葛根芹菜糖苷 Bromothymol blue神经元核抗原抗体包装5g

蛤蚧（标准品） Bismuthiol IIFAM135B蛋白抗体包装1g

油（标准品） Bismuthiol II“衰老关键蛋白”抗体包装5g

隔山消（标准品） Beryllon II促卵泡激受体抗体包装25g

根皮苷（标准品） Bromopyrogallol red成纤维生长因子12抗体包装5g

根皮(标准品) Basic Fuchsin成纤维生长因子14抗体包装100ml

功劳木（标准品） Brilliant Yellow脑型脂肪结合蛋白抗体包装25ml

钩藤(钩藤)（标准品） Congo redFAM96B蛋白抗体包装5ml

钩藤碱(标准品) Calconcarboxylic acid脑胚胎锌指样蛋白1抗体包装1g

钩吻（标准品） Calconcarboxylic acidFAM29蛋白抗体包装25g

钩吻子（标准品） Chlorophenol redMaFF相关蛋白抗体包装5g

狗脊（标准品） Calmagite7抗体包装100g

枸杞子（标准品） CadionFEM1B抗体包装25g

枸橼血根碱 Cupferron纤维母生长因子3抗体包装5g

黑曲霉Aspergillus│niger var. niger Tiegh. 质量规格：HPLC>98%,标准品状瘤病抗体试剂盒千金藤;Cepharanthine

螺卷毛壳Chaetomium│cochliodes 质量规格：>98.5%,BR状瘤病抗体试剂盒秦皮乙;Esculetin

乳乳球菌乳亚种Lactococcus│lactis subsp. lactis 质量规格：HPLC>98%,标准品状瘤病18型衣壳蛋白L1试剂盒秦皮;Fraxetin
细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒T7 tag(recombinant T7-tagged proteins)  T7 tag标签抗原规格： 0.5mg

V5 tag(recombinant V5-tagged protein)  V5 tag多肽抗原规格： 0.5mg

KT3 tag  KT3 tag标签抗原规格： 0.5mg

VSV-G tag(vesicular stomatitis virus glycoprotein)  VSV-G tag标签抗原规格： 0.5mg

HLA-DR(human leukoyte Antigen DR)  HLA-DR抗原规格： 0.5mg