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产品分类：细胞组分分离

储存条件：—20℃,避光,6个月

用途：分离植物组织细胞核

注意事项：主要由精胺、柠檬酸钠、氯化钠、曲拉通、MOPS等组成。

配制与标定的实验原理：

1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一种白色晶体粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室温溶解度为0.02g/100g H2O。

2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂，基准试剂的预处理：称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层，然后用水洗净，烘干。

配制步骤：

1、取适量锌片放在100mL烧杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自来水、纯水洗净，烘干、冷却。

2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.1    5～0.2g Zn，盖好小表面皿。

3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地将溶液转移至250mL容量瓶中，用纯水稀释至标线，摇匀。

实验方法与判定：

1.对照品溶液的稳定性

2.对照品溶液的配制：精密量取脑对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液，作为对照品溶液。

3.色谱条件：以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱；柱温120℃；进样口温度250℃；检测器温度250℃；分流进样，分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。

4.实验方法：配制的对照品溶液，一份置冷处保存，一份置室温中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液，三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法，并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来，保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%，验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。

哌啶（标准品） Nitazoxanide19号染色体开放阅读框46抗体包装5g

派多,哌多（标准品） Nitazoxanide原癌基因cMAF抗体包装1g

他（标准品） Oligomycin A电压依赖性钙通道Cav2.1抗体包装25g

福多斯坦（标准品） Olopatadine HClL型钙通道蛋白a1亚型3抗体包装5g

福斯坦(标准品) Olopatadine HClL型钙通道蛋白a1亚型6抗体包装1g

（标准品） Oxybutynin HCl色P450 2B6抗体包装25g

杂质A（福辛普）（标准品） Oxybutynin HCl磷化β链接相互作用蛋白1抗体包装5g

辅Q10(标准品) Paroxetine HCl20号染色体开放阅读框62抗体包装1g

辅Q9(标准品) Paroxetine HCl凋亡抑制因子1抗体包装250mg

富马（标准品） Piroxicam20号染色体开放阅读框27抗体包装25g

富马 (标准品） Piroxicam酯抑制蛋白C1IN抗体包装5g

富马（标准品） Posaconazole色P450 2W1抗体包装1g

富马卢帕他定(标准品) Posaconazole脱氢抗体包装250mg

富马马斯（标准品） Riimin因子诱导凋亡抑制因子1包装1g

富马替芬(标准品) Riimin亲环蛋白PPIB抗体包装250mg

杆状毛霉Mucor│bacilliformis 质量规格：>99.0%,BR,可用于培养信号传导子及转录激活子1试剂盒 ;lindenenol

苏云金芽胞杆菌鲇泽变种Bacillus│thuringienis var. aisawai 质量规格：HPLC>99%,标准品新生状腺试剂盒乌金甙;

JCM15524资源名称: 居沉积物海杆菌 质量规格：>98.0%;FLT3拮抗剂新喋呤试剂盒D-无葡萄糖;D(+)-Glucose
GPB解离液NPPC/FITC  荧光标记促尿钠排泄肽前体CIgG(S)-(-)-α-缬氨 98%

NP/FITC  荧光标记任IgG(-)-2--D-丝氨 99%

NPM/FITC  荧光标记核仁蛋白IgGα--D-苯氨 98%

Phospho-NPM (Ser4)/FITC  荧光标记化核仁蛋白IgG反式-3-苯-L-脯氨 98%

Phospho-NPM (Thr95)/FITC  荧光标记化核仁蛋白IgGα--L-苯氨 98%

Phospho-NPM (Thr199) /FITC  荧光标记化核仁蛋白IgG2,6-二氨苯 98%

NPY /FITC  荧光标记神经肽 YIgG己 97%

NPY2R/FITC  荧光标记神经肽Y受体2IgG己 ≥97%, FCC, Kosher, FG

使用方法：

1.  常用筛选浓度

注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线（kill curve），即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。

一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL；细菌/植物细胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 杀灭曲线的建立

注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线（剂量反应曲线）来实现，至少选择5个浓度。

1）  第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜；注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。

2）  根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。

3）  第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。

4）  接下来每3-4天更换新的含药物培养基。

5）  按照固定的周期（如每2天）进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数（通常是7-10天）内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

3.   稳定转染细胞的筛选

1）  转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞（直接传代或者稀释后传代）。

注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%

2）  每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。

3）  筛选7天后观察并评估细胞克隆（集落）的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。

4）   挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5）   之后更换正常培养基培养即可。