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产品分类：微生物染色

储存条件：室温,避光,12个月

用途：用于芽孢染色。真菌染色，尤其可用于布氏杆菌染色又称科兹洛夫斯基染色

配制与标定的实验原理：

1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一种白色晶体粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室温溶解度为0.02g/100g H2O。

2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂，基准试剂的预处理：称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层，然后用水洗净，烘干。

配制步骤：

1、取适量锌片放在100mL烧杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自来水、纯水洗净，烘干、冷却。

2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15～0.2g Zn，盖好小表面皿。

3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地将溶液转移至250mL容量瓶中，用纯水稀释至标线，摇匀。

实验方法与判定：

1.对照品溶液的稳定性

2.对照品溶液的配制：精密量取脑对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液，作为对照品溶液。

3.色谱条件：以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱；柱温120℃；进样口温度250℃；检测器温度250℃；分流进样，分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。

4.实验方法：配制的对照品溶液，一份置冷处保存，一份置室温中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液，三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法，并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来，保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%，验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。

枯草芽孢杆菌羊毛甾14α-去甲基化蛋白抗体Human PDCD1LG1(Programmed Cell Death Protein 1 Ligand 1) ELISA Kit人神经丝蛋白H(NF-H)免疫试剂盒

申氏不动杆菌*补体C5抗体Human NTRK2(Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 2) ELISA Kit人神经生长因子受体(NGFR)免疫试剂盒

单色下皮黑孔菌5号染色体开放阅读框24抗体Human PⅢCP(Procollagen Ⅲ C-Terminal ProPeptide) ELISA Kit人神经生长因子前体(proNGF)免疫试剂盒

海榄雌小单孢菌5号染色体开放阅读框42抗体Human NTRK3(Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 3) ELISA Kit人神经生长因子(NGF)免疫试剂盒

致密曲霉5号染色体开放阅读框49抗体Human PACAP-38(Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 38) ELISA Kit人神经母瘤抗体(NB-Ab)免疫试剂盒

植物乳杆菌5号染色体开放阅读框35抗体Human PADI4(Peptidyl Arginine Deiminase Type IV) ELISA Kit人(GM1)抗体(IgM)免疫试剂盒

云南红球菌中心体蛋白192抗体Human MT3(Metallothionein 3) ELISA Kit人(GM1)抗体(IgG)免疫试剂盒

动球菌中心体蛋白27抗体Human N-ERC/Mesothelin ELISA Kit人神经胶质纤维性蛋白(GFAP)免疫试剂盒

新城疫病中心体蛋白290抗体Human MT1M(Metallothionein 1M) ELISA Kit人神经激肽B(NKB)免疫试剂盒

嗜盐碱球菌中心体蛋白63抗体Human NFE2L2(Nuclear Factor, Erythroid Derived 2 Like 2) ELISA Kit人神经调节1亚型HRGβ1(NRG1)免疫试剂盒

紫萁小菇中心体蛋白70/p10结合蛋白抗体Human NRG-3(Neuregulin 3) ELISA Kit人神经调节蛋白4(NRG4)免疫试剂盒

弯孢菌中心体蛋白72抗体Human OVA sIgG(Ovalbumin Specific IgG) ELISA Kit人神经调节蛋白3(NRG3)免疫试剂盒

Curvularia  cocis Matsush. 中心体蛋白95抗体Human OXA(Orexin A) ELISA Kit人神经调节蛋白2(NRG2)免疫试剂盒

谢瓦曲霉中心体蛋白89抗体Human NRG-4(Neuregulin 4) ELISA Kit人神经穿透1(NPTX-1)免疫试剂盒

*蜜环菌CERD4蛋白抗体Human NT-ProANP(N-Terminal Pro Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit人上皮中性粒活化肽78(ENA-78/CXCL5)免疫试剂盒

波茨坦芽孢杆菌CES1P1蛋白抗体Human NTRK3(Neurotrophic Tyrosine Kinase Receptor Type 3) ELISA Kit人上皮粘附分子(Ep-CAM/CD362)免疫试剂盒

苏云金芽孢杆菌Bacillus│thuringiensis 质量规格：BSCD117分子试剂盒丁香树脂双葡萄糖苷

苏云金芽孢杆菌Bacillus│thuringiensis 质量规格：>97%(HPLC),BCCD10分子试剂盒当药宁

云南节丛孢Arthrobotrys│yunnanensis 质量规格：>98%,BRCC趋化因子受体7试剂盒丹参新
孔雀石绿水溶液KLK 6(Human Kallikrein 6) ELISA Kit  人mei6规格： 96T

PaCoA(Human Phosphorylated acetyl CoA) ELISA Kit  人磷suan化乙酰辅meiA规格： 48T

PGAM2(Human phosphoglycerate mutase 2) ELISA Kit  人磷suan甘油suan变位mei2规格： 48T

PTGDS(Human Prostaglandin D synthase) ELISA Kit  人前列腺suD合成mei规格： 48T

PPIL1(Human peptidylprolyl isomerase(cyclophilin)-like 1) ELISA Kit  人肽酰脯氨酰异构mei(亲环蛋白)样1规格： 48T

使用方法：

1.  常用筛选浓度

注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线（kill curve），即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。

一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL；细菌/植物细胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 杀灭曲线的建立

注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线（剂量反应曲线）来实现，至少选择5个浓度。

1）  第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜；注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。

2）  根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。

3）  第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。

4）  接下来每3-4天更换新的含药物培养基。

5）  按照固定的周期（如每2天）进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数（通常是7-10天）内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

3.   稳定转染细胞的筛选

1）  转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞（直接传代或者稀释后传代）。

注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%

2）  每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。

3）  筛选7天后观察并评估细胞克隆（集落）的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。

4）   挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5）   之后更换正常培养基培养即可。