人骨肉瘤细胞，U-2OS_冻存细胞-上海慧颖生物科技有限公司手机版

详细介绍

人骨肉瘤细胞，U-2OS 简介：

细胞名称：U-2 OS人骨肉瘤细胞

性别：女

组织来源：骨；骨肉瘤

细胞形态：上皮细胞

细胞背景：J. Ponten and E. 这株细胞(原名2T)源自15岁女孩的胫骨中等分化的肉瘤。与WI-38共培养或CF检测SV40，RSV或腺病毒时未检测到病毒。 1972年发现支原体污染并去除。在本库通过支原体检测。在本库通过STR检测。

培养条件：RPMI-1640(GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L)，85%；热灭活马血清，10%；优质胎牛血清，5%。气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度。

人骨肉瘤细胞，U-2OS 细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养隔夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养隔夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。

注意事项：

1)收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们。

2) 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。