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TOV21G细胞*人卵巢癌细胞系

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慧颖细胞库提供的所有细胞仅供科研使用

原代细胞的培养是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培 养；因此，较为严格地说是指成功传代之前的培养，此时的细胞保持原有细胞的基本性质，如果是正常细胞，仍然保留二倍体数。不同的原代细胞传代次数不同，具体需咨询客服人员或者自行查阅 相关资料。

细胞株是通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标志的培 养细胞。从培养代数来讲，理论上可培养到40-50代。

客户应具有一定细胞培养知识与经验，并具备基本培养条件（细胞培养实验室，无菌操作台、CO2培养箱，可拍照倒置显微镜等），并按说明书要求准备好相应的无菌的培养基、血清、双抗、细胞培养瓶、培养板等。如果因客户缺少基本培养经验和培养条件而导致细胞死亡或污染，不在我司售后责任之内。

产品名称：TOV21G细胞*人卵巢癌细胞系

生长状态：贴壁生长|悬浮生长|半贴壁半悬浮生长

细胞形态：上皮样|成纤维样|圆形|不规则

培养条件：DMEM|1640|MEM|IMDM+10% FBS

细胞规格：5-10×105细胞量

库存状态：现货

运输方式：新鲜细胞或冻存细胞

质控：无支原体、无污染、符合标准

洁净区，并不是没有细菌，而是细菌的数量非常少，国家标准100级的洁净标准是浮游菌数不得超过5个每立方米，沉降菌数不得超过1个每培养皿.而国外的标准比我国的还要高一点，要求的数量更少。在我们的洁净操作台里，并不是真正一个细菌都没有的，所以在操作的时候还是要尽量利索迅速地完成操作。尽量减少进入培养体系细菌的数量。 处理细菌污染的重要原则就是：无限地稀释细菌的浓度，无限地减少细菌的数量！ 1）.将污染的培养液倒掉，转烧瓶口，加入10mlPBS，适当晃动清洗培养瓶，然后倒掉。转烧瓶口。  2）.继续加入10mlPBS，同样方法晃动，清洗培养瓶，然后倒掉。 3）.继续加入5mlPBS，同样方法洗瓶，主要是培养面，然后倒掉。 4）.重复步骤3再洗。 5）.重复步骤3再洗。  6）.加入3-5ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。 7）.加入3ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。 8）.再加入5mlPBS洗瓶，然后吸出。  9）.加入10ml培养液，加入2ml双抗，放置培养箱培养，5小时之后，倒掉培养基，加入PBS洗瓶两次，然后加入胰酶消化，吹打后置于离心机800-1000r/min离心，然后洗一次。置于新的培养瓶里培养，培养体系加入2ml双抗。  10）.24h之后，视情况换液，若仍然污染严重，培养基浑浊，重复以上步骤，若看不到污染物，则继续步骤1)、3）、4）、6）、8），然后加入培养液培养，培养体系加入2ml双抗.  11).24h之后，若仍污染严重，可再重复一次，若还污染只能弃之（不过一般没有出现这种情况），若镜下不见污染物，则换液PBS洗瓶，正常培养。  以上是对于细菌污染（常见为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌）；若为霉菌或者真菌污染，加入两性霉素B清洗和培养，终浓度一般为2.5μg/ml（在30μg/ml时会有细胞毒性）。另外也可以选择在培养基里加3ug/ml的制霉菌素或放线菌素D。其它操作同；若为支原体或者黑胶虫污染，基本上都是重新弄细胞了。对于黑胶虫污染，我们会预防为主。以上方法主要是针对贴壁生长的细胞，在操作的过程中，一定要小心操作动作，轻柔缓慢，切忌大动作鲁莽。防止细胞脱落。

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