MPC细胞|小鼠垂体细胞培养

产品名称：MPC细胞

中文名称：小鼠垂体细胞

生长状态：贴壁生长

培养条件：DMEM（高糖） +10% 德国SERANA胎牛血清（建议）

MPC细胞|小鼠垂体细胞培养

慧颖生物公司专业提供美国ATCC细胞库来源正常细胞系、肿瘤细胞系、癌细胞系（三千多种），提供细胞株生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息，我们拥有丰富的细胞系培养经验，能提供细胞培养*的，让您实验再无烦扰！

1、收到细胞，请查看瓶子是否有破裂，培养基是否漏出，是否浑浊，如有请尽快。

2、收到细胞，如包装完好，请在显微镜下观察细胞。,由于运输过程中的问题，细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来，显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况，出现此状态时，请不要打开细胞培养瓶，先不要把培养基吸出来。应立即将培养瓶置于细胞培养箱里静止3-5小时左右，让细胞先稳定下，再于显微镜下观察，此时多数细胞会重新贴附于瓶壁。如细胞仍不能贴壁，请用台盼蓝染色法鉴定细胞活力，如台盼蓝染色证实细胞活力正常请按悬浮细胞的方法处理

3. 收到细胞时如无异常情况 ，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，用75%酒精（建议配置75%酒精的水也是灭菌超纯水。喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作：然后打开盖子，先用枪头把培养基吸出10ML左右，放在离心管里，然后瓶口过火，（严禁直接倾倒），这样可以保证不污染，再用10ML的移液管，将剩余的培养基全部吸出，放于离心管中，培养瓶中只剩余5-10ML左右培养液继续培养就可以了）：超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。

如为悬浮细胞，吸出培养液，1000转/分钟离心3-5分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。

4，将培养瓶置于37℃培养箱中培养，盖子微微拧松。吸出的培养基可以保存在灭菌过的瓶子里，存放于4℃冰箱，以备不时之需。第二天换液时，要配制新鲜的培养基和进口胎牛血清。这样对细胞生长更好。不要再用我们原瓶的培养基了。

5 、24小时后，细胞形态已恢复并贴满瓶壁，就可以传代了。（贴壁细胞）将培养瓶里的培养基倒去，加3-5ml（以能覆盖细胞生长面为准）PBS或Hanks’液洗涤后弃去。加0.5-1ml  0.25%含EDTA的胰酶消化，消化时间以具体细胞为准，一般1-3分钟，不超过5分钟。可以放入37℃培养箱消化。轻轻晃动瓶壁，见细胞脱落下来，加入3-5ml培养基终止消化。用移液管轻轻吹打瓶壁上的细胞，使之*脱落，然后将溶液吸入离心管内离心，1000rpm/5min。弃上清，视细胞数量决定分瓶数，一般一传二，如细胞量多可一传三，有些细胞不易传得过稀，有些生长较快的细胞则可以多传几瓶，以具体细胞和经验为准。（悬浮细胞）用移液管轻轻吹打瓶壁，直接将溶液吸入离心管离心即可。

6，贴壁细胞 ，悬浮细胞。严格无菌操作。换液时，换新的细胞培养瓶和换新鲜的培养液和进口胎牛血清，37度    5%CO2 培养

7.  收到细胞后，请镜下观察细胞，用恰当方式处理细胞。若悬浮的细胞较多，请离心收集细胞，接种到一个新的培养瓶中。弃掉原液，使用新鲜配制的培养基，使用进口胎牛血清. 刚接到细胞，若细胞不多时 血清浓度可以加到15％去培养。若细胞迏到80%左右 ，血清浓度还是在10％。

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MPC细胞|小鼠垂体细胞培养 细胞培养条件

1，1640培养基（GIBCO,货号11875093） +10%进口胎牛血清（GIBCO,货号10099141）+2mM  L-G(L-谷氨酰胺)+1mM  Sodium pyruvate+10mM   HEPES(gibco.。货号。15630-080)

2,DMEM高糖培养基（GIBCO,货号11995065）+10%进口胎牛血清（GIBCO,货号10099141）+4mM  L-G(L-谷氨酸胺)+1mM （丙酮酸钠1,HEPES(gibco.。货号。15630-080)

3,E,MEM培养基（GIBCO,货号11095080）+10%进口胎牛血清（GIBCO,货号10099141）+NEAA(非必需氨基酸)+2mM  L-G(L-谷氨酸胺)+1mM （丙酮酸钠）

4，F12K培养基 （GIBCO,货号11765054）+10%进口胎牛血清（GIBCO,货号10099141）+2mM  L-G(L-谷氨酸胺)

5，McCoy's 5a培养基（GIBCO,货号16600082）+10%进口胎牛血清（GIBCO,货号10099141）+1.5mM  L-G(L-谷氨酸胺)

6 . L 15培养基（Hyclone,货号SH30525.01）+10%进口胎牛血清（GIBCO,货号10099141）+1.5mM  L-G(L-谷氨酸胺)

7. DMEM/F12培养基（GIBCO,货号11330032）+10%进口胎牛血清（GIBCO,货号10099141）+1.5mM  L-G(L-谷氨酸胺)

8. IMDM培养基（GIBCO,货号C12440500BT）+10%进口胎牛血清（GIBCO,货号10099141）+1.5mM  L-G(L-谷氨酸胺)

2, L-G(L-谷氨酸胺)。L-Glutamine 200mM  (GIBCO。货号25030-081)

3,NEAA(非必需氨基酸).(GIBCO。货号11140-050)

4..sodium.pyruvate  (GIBCO。货号11360-070)  

100ML 1640*培养基配法
1640培养基   86ML 

 FBS 血清        10ML      

 L-谷氨酸胺。100X  1ML
丙酮酸钠  100X        1ML

HEPES(1M) 10mM  1ML  

抗菌素（青、链霉素） 1ML