Yeasen/翌圣生物 品牌
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BSA牛血清白蛋白(低内毒素)
面议Standard Grade 牛血清白蛋白
¥238BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)
¥278His标签蛋白琼脂糖纯化树脂
¥498小鼠抗β-actin单克隆抗体
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¥320鼠源RNase抑制剂(Murine RNase Inhibitor)
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面议Human IgG 人免疫球蛋白G
面议Recombinant Biotinylated Human CDH17/Cadherin 17 D
¥3225UCF·METM UltraNuclease GMP-grade全能核酸酶
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 储存 | 价格(元) |
UCF·METM UltraNuclease GMP-grade全能核酸酶 | 20157ES25 | 25 KU | -20℃ | 1125.00 |
20157ES50 | 50 KU | -20℃ | 1965.00 | |
20157ES60 | 100 KU | -20℃ | 3245.00 | |
20157ES80 | 1 MU (1000 KU) | -20℃ | 27585.00 | |
20157ES90 | 5 MU (5000 KU) | -20℃ | 118655.00 |
产品描述
UltraNuclease(全能核酸酶),又称非限制性核酸内切酶、广谱核酸酶;是一种来源于Serratia Marcescen的非特异性核酸内切酶,可在链内任意核苷酸间进行切割,将核酸*消化成2-5个碱基长度的5'-单磷酸寡核苷酸,能够在非常广泛的条件下(6 M Urea,0.1 M Guanidine HCl,0.4% Triton X100,0.1% SDS,1 mM EDTA,1 mM PMSF)降解各种形式的(双链,单链,线状,环状,天然或变性)DNA和RNA,广泛用于去除生物制品中的核酸。
本品经基因工程改造在Escherichia coli (E. coli)中表达纯化并在GMP环境下制备,不仅可在科学研究中降低细胞上清和细胞裂解液的粘度,提高蛋白纯化效率及功能研究;还可以应用在病毒纯化、疫苗生产、蛋白和多糖类制药工业作为宿主残留核酸去除试剂,将宿主残留核酸降至皮克(pg)级别从而提高生物制品功效和安全性;并且可以有效防止细胞治疗和疫苗研究中人外周血单核细胞(PBMC)的结团。
本品以无菌液体酶的形式提供,储存于缓冲液(20 mM Tris-HCl pH 8.0,2 mM MgCl2,20 mM NaCl,50%甘油)中,无色透明液体。
产品性质
来源 | E. coli |
生产管理标准 | ISO9001/GMP |
分子量(Molecular Weight) | 26.5 kDa |
等电点 | 6.85 |
纯度(Purity) | ≥ 99%(SDS-PAGE) |
酶活(Enzyme Activity) | ≥ 250 U/μL |
比活(Specific Activity) | ≥ 1.5×106 U/mg蛋白 |
最适pH(Optimum pH) | 8.0(工作范围pH 6-10) |
最适温度(Optimum Temperature) | 37℃(工作范围0-42℃) |
辅助因子(Cofactor) | 1-10 mM Mg2+ |
蛋白酶活性(Protease) | Undetected |
无菌检查(Sterility) | Undetected |
内毒素(Endotoxin) | < 0.25EU/1000U |
宿主蛋白残留(Host protein) | < 10ppm(μg/mL) |
储存缓冲液(Storage Buffer) | 20 mM Tris-HCl pH8.0,2 mM MgCl2,20 mM NaCl,50%甘油 |
活性单位定义(Unit Definition) | 在37℃,pH 8.0反应条件下,2.625 mL反应体系中,在30 min内使△A260吸收值变化1.0(相当于*消化37 μg鲑鱼精DNA成为寡核苷酸)所用的酶量定义为一个活性单位(U)。 |
运输和保存方法
冰袋运输。-20℃保存,有效期1年。若是打开包装后并4℃放置超过一周,建议过滤除菌防止微生物污染。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
推荐使用条件
条件参数 | 最///佳条件 | 有效条件 |
Mg2+ | 1-2 mM | 1-10 mM |
pH | 8-9 | 6-10 |
温度 | 37℃ | 0-42℃ |
DTT | 0-100 mM | >0 mM |
巯基乙醇 | 0-100 mM | >0 mM |
单价阳离子 | 0-20 mM | 0-150 mM |
磷酸根离子 | 0-10 mM | 0-100 mM |
推荐使用量及处理时间
UltraNuclease用量(终浓度) | 处理时间 |
0.25 U/mL | > 1 h |
2.5 U/mL | 15 min |
25 U/mL | 2 min |
使用方法
样本准备
贴壁细胞:去除培养基,用PBS清洗细胞,去除上清。
悬浮细胞:离心收集细胞,用PBS清洗细胞,6,000 rpm 离心10 min,收集沉淀。
大肠杆菌:离心收集菌体,用PBS清洗1次,8,000 rpm 离心5 min,收集沉淀。
2、样品处理
将收集到的细胞沉淀按照质量(g)与体积(mL)比1:(10~20) 的比例进行裂解处理,也可通过在冰上或室温通过机械或化学方法裂解细胞(1 g细胞约为109个)。
3、酶的添加
按照250 Units消化1 g细胞沉淀的比例添加UltraNuclease,也可以跟据上表中的推荐使用量自行选定添加方案,在一定范围内增加酶量,消化所需时间相应减少。
4、上清获取
以12,000 rpm的转速离心30min获得细胞裂解液上清,再进行后续相关实验。
【注】若溶液为高盐溶液,偏酸性或者偏碱性,含有较高浓度的去垢剂、变性剂,应适当增加酶的用量或延长孵育时间。
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产品名称 | 货号 | 规格 |
UCF·METM UltraNuclease全能核酸酶 | 20156ES25 | 25 KU |
20156ES50 | 50 KU | |
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UCF·METM UltraNuclease(Endotoxin-free)全能核酸酶 | 20125ES25 | 25 KU |
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20125ES60 | 100 KU |
HB210326