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Murine RNase Inhibitor(40 U/µL) 鼠源RNase抑制剂
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格(元) |
Murine RNase Inhibitor(40 U/µL) 鼠源RNase抑制剂 | 10603ES05 | 2 KU | 216.00 |
Murine RNase Inhibitor(40 U/µL) 鼠源RNase抑制剂 | 10603ES10 | 10 KU | 916.00 |
Murine RNase Inhibitor(40 U/µL) 鼠源RNase抑制剂 | 10603ES20 | 20 KU | 1695.00 |
Murine RNase Inhibitor(40 U/µL) 鼠源RNase抑制剂 | 10603ES60 | 100 KU | 7796.00 |
Murine RNase Inhibitor(40 U/µL) 鼠源RNase抑制剂 | 10603ES74 | 2×200 KU | 26582.00 |
产品描述
RNase抑制剂(RNase inhibitor)是存在于人的胎盘中一种特异性核糖核酸酶(RNase)抑制剂,其特异性失活RNase的原理是:与RNase以非共价键结合形成复合体,造成RNase失活。
本产品是以可溶形式在大肠杆菌中表达纯化的重组鼠源RNase抑制剂,能够广泛抑制各种类型RNase(RNase A, B, C)。经RT-PCR、RT-qPCR检验,本产品能与Hifair® Ⅱ Reverse Transcriptase(货号:11110ES)及各种DNA Polymerase兼容。与人源RNase inhibitor相比,本产品不含人源蛋白中的两个对氧化非常敏感的半胱氨酸,因而具有更高的抗氧化活性。同时,更加适合于对高DTT敏感性实验(如qPCR等)。
本产品可用于cDNA第—链合成、多核糖体的分离(Polysome isolation)、体外转录和体外无细胞翻译系统等实验。
运输与保存方法
冰袋运输。产品-20℃保存。有效期2年。
活性定义
抑制5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定义为1个活性单位(U)。RNase A活性通过水解Cyclic 2',3'-CMP生成3'-CMP定量求得。
质量控制
核酸外切酶残留检测:200 U本品和0.6 μg λ-Hind III在74℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测:200 U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA残留检测:50 μL体系中,加入200 U本品,以ddH2O为模板,扩增E.coli 16s rDNA基因。35个循环后进行1%琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。
应用实例(逆转录实验)
1. 在RNase free离心管中配制如下混合液
组分 | 体积(μL) |
RNase free ddH2O | to 20 |
5× Hifair® Ⅱ Buffer | 4 |
Oligo (dT)18 (50 μM) | 1 |
dNTP Mix (10 mM each) | 1 |
RNase Inhibitor (40 U/μL) | 1 |
Hifair® Ⅱ Reverse Transcriptase (200 U/μL) | 1 |
模板RNA | Total RNA:1 ng-5 μg |
2. 轻轻混匀。
3. 42℃ 45 min,85℃ 5 min。
4. 产物于-20℃保存。
注意事项
1. 本品抑制RNase活性的pH值范围较广,在pH 7~8时表现大活性。
2. 避免起泡或剧烈搅拌、涡旋等操作,以防止本品失活。
3. 本品不抑制RNase H活性。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
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HB200127