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S8751-100 交联琼脂糖凝胶CL-6B
S8751-100 交联琼脂糖凝胶CL-6B
核酸电泳是进行核酸研究的重要手段,是核酸探针、核酸扩增和序列分析等技术所*的组成部分。核酸电泳通常在琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶中进行,浓度不同的琼脂糖和聚丙烯酰胺可形成分子筛网孔大小不同的凝胶,可用于分离不同分子量的核酸片段。以下中间介绍的是琼脂糖核酸电泳操作步骤。
琼脂糖核酸电泳操作步骤
1.用蒸馏水将制胶模具和梳子冲洗干净,放在制胶平板上,封闭模具边缘,架好梳子;
2.根据欲分离DNA片段大小用凝胶缓冲液配制适宜浓度的琼脂糖凝胶:准确称量琼脂糖干粉,加入到配胶用的三角烧瓶内,定量加入电泳缓冲液(一般20~30?ml);
3.放入到微波炉内加热熔化。冷却片刻,加入一滴荧光染料,轻轻旋转以充分混匀凝胶溶液,倒入电泳槽中,待其凝固;
4.室温下30~45分钟后凝胶*凝结,小心拔出梳子,将凝胶安放在电泳槽内;
5.向电泳槽中倒入电泳缓冲液,其量以没过胶面1mm为宜,如样品孔内有气泡,应设法除去;
6.在DNA样品中加入10×体积的载样缓冲液(loading?buffer),混匀后,用枪将样品混合液缓慢加入被浸没的凝胶加样孔内;
7.接通电源,红色为正极,黑色为负极,切记DNA样品由负极往正极泳动(靠近加样孔的一端为负)。一般60~100V电压,电泳20~40min即可;
8.根据指示剂泳动的位置,判断是否终止电泳;
9.电泳完毕,关上电源,在凝胶成像仪上观察电泳带及其位置,并与核酸分子量标准Marker比较被扩增产物的大小。