土壤锰过氧化物酶检测试剂盒 微量法

锰过氧化物酶（EC1.11.1.13）是一种含亚铁血红素的过氧化物酶，主要存在于担子菌中，属于木质素降解酶系，能有效的降解木质素及废水和土壤中比较难降解的氯化物，叠氮化合物、DTT，多环芳烃等。锰过氧化物酶在Mn2+存在的条件下，将愈创木酚氧化为四邻甲氧基连酚，在465nm 有特征吸收峰。

土壤锰过氧化物酶检测试剂盒 微量法

 对照管 测定管土样（mg） 20 20 甲苯（μL） 15 15 25℃，静置15min 试剂一（μL） 140 120 试剂二（μL） 20 试剂三（μL） 40 40 试剂四（μL） 20 20 充分混匀，于30℃反应10min，于10000rpm，4℃离心10min，取180μL于微量石英比色皿/96 孔板于微量石英比色皿/96 孔板，蒸馏水调零，测定465nm 处吸光值，记为A 对照管和A 测定管，△A=A 测定管- A 对照管

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下酶活性定义：每克土壤每分钟氧化1nmol 愈创木酚所需的酶量为一个酶活力单位。 S-MnP 活性（nmol/min /g）=△A /(ε×d)×V 反总÷W÷T= 8.3×△ A÷W ε：愈创木酚摩尔消光系数：12100L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；V 反总：反应总体积，200μL； W：样本质量，g；T：反应时间，10min b. 用96 孔板测定的计算公式如下酶活性定义：每克土壤每分钟氧化1nmol 愈创木酚所需的酶量为一个酶活力单位。 S-MnP 活性（nmol/min /g）=△A /(ε×d)×V 反总÷W÷T= 16.6×△ A÷W ε：愈创木酚摩尔消光系数：12100L/mol/cm；d：比色皿光径，0.5cm；V 反总：反应总体积， 200μL；W：样本质量，g；T：反应时间，10min。