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人来源细胞外囊泡的定性和定量分析
CD9/63/81-Capture 人外泌体ELISA试剂盒(链霉亲和素HRP)
CD9 / CD63 / CD81-Capture 人外泌体ELISA试剂盒(链霉亲和素HRP)可用于检测和定量细胞培养上清和体液样品中的外泌体。外泌体标记蛋白抗CD9 / CD63 / CD81抗体固相化后,可捕获表达抗CD9 / CD63 / CD81抗体的外泌体。此外,抗体与CD9、CD63、CD81特异性结合,可用于检测和定量人来源的外泌体。
◆特点
● 特异性检测人来源外泌体
● 无需分离外泌体,可直接检测培养上清及血液样品中的外泌体
● 和外泌体标准品配合使用,可定量分析外泌体
● 操作简便,再现性高
◆检测原理
PS Capture™ Exosome ELISA Kit系列(图右)不依赖动物种属,可以捕获具有磷脂酰丝-氨-酸的细胞外囊泡,本试剂盒(图左)可以特异性捕获人CD9/63/81标记的细胞外囊泡,即使使用小鼠和大鼠等实验动物以及含有FBS等的牛来源细胞外囊泡的样品,也可以特异性捕获和检测人来源CD9/63/81的阳性细胞外囊泡。
◆应用数据
向小鼠EDTA血浆中添加人来源外泌体的加标回收实验
向小鼠EDTA血浆(稀释2倍)中添加各浓度的外泌体(COLO201细胞来源,纯化品)(产品编号:052-09301),使用本试剂盒进行检测后对稀释样品进行线性分析。
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| 样品:纯化后各浓度的COLO201细胞来源的外泌体和小鼠EDTA血浆 检测:CD9/63/81-Capture 人外泌体ELISA试剂盒
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【结果】
结果显示,可以很好的对小鼠EDTA血浆样品中添加的人来源外泌体进行稀释后的线性分析。
比较人来源细胞系培养上清的表达水平
使用本试剂盒检测分别稀释2、10、25和100倍的12种人源细胞的培养上清。
CD9-Capture 人外泌体ELISA试剂盒
CD63-Capture 人外泌体ELISA试剂盒
CD81-Capture 人外泌体ELISA试剂盒
【结果】
结果显示,CD9、CD63、CD81的表达水平因细胞种类而异。这一结果与使用PS Capture 外泌体ELISA试剂盒(抗小鼠IgG HRP)(产品编号:297-79201)所得的 “各种细胞培养的外泌体标记蛋白表达分析 ”数据相似。
※ 部分细胞系在稀释2倍和10倍时会检测不到信号,这是因为信号太强,超过了仪器的检测上限。
人来源外泌体检测中的特异性比较
检测试剂盒:
PS Capture™ 外泌体ELISA Kit (链霉亲和素HRP) 【产品编号:298-80601】
CD9-Capture 人外泌体ELISA试剂盒 (链霉亲和素HRP)【产品编号:296-83701】
检测样品:添加了各浓度纯化COLO201外泌体的含10%FBS的D-MEM培养基
※ 使用超速离心处理的FBS
检测抗体:抗CD9,单抗(1K)【产品编号:014-27763】
※ 使用生-物-素标记的人/牛交叉反应的CD9抗体。
将添加了各浓度的外泌体,COLO201细胞来源,纯化品(产品编号:052-09301)的含10%FBS的D-MEM样品(2倍稀释)分别加入到两款ELISA试剂盒中进行反应,使用人/牛交叉反应的CD9抗体(Clone : 1K)【产品编号:014-27763】作为检测抗体,并对人来源外泌体进行定量。
PS Capture™ ELISA不仅可以捕获人来源外泌体,还可以捕获FBS来源外泌体。CD9-Capture ELISA由于固相化了人特异性抗体,只能特异性检测不同浓度的人来源外泌体。
◆外泌体检测/定量ELISA试剂盒选择表
系列名称 | PS Capture™ Exosome ELISA Kit | CD9/63/81-Capture Human Exosome ELISA Kit | |||
产品编号 | 297-79201 | 298-80601 | 296-83701 | 290-83601 | 292-83801 |
产品名称 | PS Capture™ 外泌体ELISA试剂盒 (抗小鼠IgG POD) | PS Capture™ 外泌体ELISA Kit (链霉亲和素HRP) | CD9-Capture 人外泌体ELISA试剂盒(链霉亲和素HRP) | CD63-Capture 人外泌体ELISA试剂盒(链霉亲和素HRP) | CD81-Capture 人外泌体ELISA试剂盒(链霉亲和素HRP) |
产品规格 | 96 tests | 96 tests | 96 tests | 96 tests | 96 tests |
捕获分子 | Tim4蛋白 | Tim4蛋白 | 抗人CD9抗体 (宿主:大鼠) | 抗人CD63抗体 (宿主:小鼠) | 抗人CD81抗体 (宿主:小鼠) |
检测抗体 | 抗人CD63抗体 (宿主:小鼠) | 抗人CD63抗体 (宿主:小鼠) | 抗人CD9抗体 (宿主:大鼠) | 抗人CD63抗体 (宿主:小鼠) | 抗人CD81抗体 (宿主:大鼠) |
酶与一抗结合的方法 | 二抗 | 生/物/素-链酶亲和素 | 生/物/素-链酶亲和素 | 生/物/素-链酶亲和素 | 生/物/素-链酶亲和素 |
样品类型 | 纯化外泌体 培养上清液※1 | 纯化外泌体 细胞培养上清液 体液(血清、血浆等) | 纯化外泌体 细胞培养上清液 体液(血清、血浆等) | 纯化外泌体 细胞培养上清液 体液(血清、血浆等) | 纯化外泌体 细胞培养上清液 体液(血清、血浆等) |
交叉物种 | 人、小鼠、大鼠等※2 | 人、小鼠、大鼠等※2 | 人 | 人 | 人 |
检测对象 | PS阳性外泌体※3 | PS阳性外泌体※3 | 人CD9阳性外泌体 | 人CD63阳性外泌体 | 人CD81阳性外泌体 |
※1 检测用二抗会与人、小鼠、大鼠的IgG发生非特异性反应,因此不可用于血清/血浆的检测。
※2 试剂盒提供的抗体为抗人CD63抗体,因此对人以外的实验对象进行检测时需要另外准备合适的抗体。
※3 如使用的不是去除外泌体的FBS,则需要另外检测FBS来源的PS阳性外泌体。
◆产品列表
产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |
296-83701 | CD9-Capture Human Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP) CD9-Capture 人外泌体ELISA试剂盒(链霉亲和素HRP) | 96 tests | 基因研究用 |
290-83601 | CD63-Capture Human Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP) CD63-Capture 人外泌体ELISA试剂盒(链霉亲和素HRP) | 96 tests | 基因研究用 |
292-83801 | CD81-Capture Human Exosome ELISA Kit (Streptavidin HRP) CD81-Capture 人外泌体ELISA试剂盒(链霉亲和素HRP) | 96 tests | 基因研究用 |
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013-28171 | Anti CD9, Rat Monoclonal Antibody (77B) | 20 μL | 免疫化学用 |
019-28173 | Anti CD9, Rat Monoclonal Antibody (77B) | 100 uL | 免疫化学用 |
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012-27063 | Anti CD63, Monoclonal Antibody (3-13) | 100 μL | 免疫化学用 |
019-27713 | Anti CD63, Monoclonal Antibody (3-13) , Biotin Conjugated | 100 μL | 免疫化学用 |
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