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上海市所在地
产品名称 | 规格 | 货号 |
磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)生化检测试剂盒 | 100管/96样 50管/48样 | EY-01S1373 |
测定意义:
PEPCK(EC 4.1.1.32)广泛存在于动物、植物、微生物和细胞中,催化草酰乙酸转化为磷酸烯醇式丙酮酸,是调节糖异生途径的关键酶。
测定原理:
PEPCK催化草酰乙酸生成磷酸烯醇式丙酮酸和CO2,丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶进一步依次催化NADH氧化生成NAD+,在340nm下测定NADH下降速率,即可反映PEPCK活性。
需自备的仪器和用品:
分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂一:液体×1瓶,室温保存。
试剂二:液体×1瓶,4℃保存。
试剂三:粉剂×2瓶,-20℃保存。临用前加入22mL试剂二,现配现用。
试剂四:液体×1支,4℃保存。
1、组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。16000g,4℃离心20min,取上清置冰上待测。
2、细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);16000g, 4℃离心20min,取上清液置冰上待测。
3、血清等液体:直接测定。
(1)按照蛋白浓度计算
活性单位定义:25℃中每毫克蛋白每分钟氧化1nmol NADH 为1个酶活单位。
ADH (nmol/min/mg prot) =(△A÷ε÷d×V反总×109) ÷(Cpr×V样)÷T
=1608×△÷Cpr
(2)按照样本质量计算
活性单位定义:25℃中每克组织每分钟氧化1nmol NADH 为1个酶活单位。
ADH (nmol/min/g鲜重) =(△A÷ε÷d×V反总×109) ÷(W×V样÷V样总)÷T
=1608×△A÷W
(3)按细胞数量计算
活性单位定义:25℃中每104个细胞每分钟氧化1nmol NADH 为1个酶活单位。
ADH (nmol/min/104cell) =(△A÷ε÷d×V反总×109)÷(细胞数量×V样÷V样总)÷T
=1608×△A ÷细胞数量
(4)按液体体积计算
活性单位定义:25℃中每毫升血清每分钟氧化1nmol NADH 为1个酶活单位。
ADH (nmol/min/mL) =(△A÷ε÷d×V反总×109) ÷V样÷T
=1608×△A
ε:NADH摩尔消光系数,6.22×103L/mol/cm;d:比色皿光径,1 cm;V反总:反应体系总体积,1000μL=0.001 L;Cpr:上清液蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;V样:加入反应体系中上清液体积,100μL=0.1 mL;T:反应时间,1min。
通用型CHIP DNA分子克隆试剂盒 | 糖果甘素(dulcin)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 | 科玛嘉ECC显色培养基 规格: 1000ml/瓶 用途: 用于大肠杆菌和大肠菌群的鉴定和计数 |
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活体细胞半胱12(CASPASE-12)活性原位荧光染色检测试剂盒 | COLLAGEN II蛋白免疫共沉淀分析试剂盒 | Eztest蒸汽自含式生物指示剂 规格: 100支/盒 用途: 用于监视蒸汽的自含式生物指示剂 |
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牛病毒性腹泻病毒(Bovine Viral Diarrhoea Virus;BVDV) | FB1Broth | PYG液体培养基 250g 培养双歧杆菌用于乙酸和乳酸代谢产物测定 |
二荧光素(Fluorescein diacetate)植物细胞繁殖测定试剂盒 | LB肉汤颗粒 300ml/袋*10 用于基因工程菌大肠杆菌培养 | TPY琼脂培养基 TPY medium 250 用于双歧杆菌分离培养(GB标准) |
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