EZ Trans Lipo细胞转染试剂(脂质体)

AC04L071EZ Trans Lipo细胞转染试剂(脂质体)

参考价: 订货量:
1300 1

具体成交价以合同协议为准
2024-08-07 11:35:20
1893
属性:
CAS:/;供货周期:现货;规格:1mL;货号:AC04L071;应用领域:化工,生物产业,综合;
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产品属性
CAS
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供货周期
现货
规格
1mL
货号
AC04L071
应用领域
化工,生物产业,综合
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和元李记(上海)生物技术有限公司

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产品简介

EZ Trans Lipo细胞转染试剂(脂质体)为李记生物新研发的细胞转染试剂,EZ Trans Lipo以纳米脂质体包裹核酸通过特殊递送机制,把外源DNA、RNA、siRNA转入各类细胞,能转染贴壁细胞、悬浮细胞,还可用于siRNA和shRNA的基因敲除实验及基因表达研究。转染效率高、细胞毒性低、适用细胞广、性价比高等优点。

详细介绍

 

EZ Trans Lipo细胞转染试剂(脂质体)

产品描述
EZ Trans Lipo细胞转染试剂(脂质体)以下简称“EZ Trans Lipo”)为李记生物新研发的细胞转染试剂,EZ Trans Lipo以纳米脂质体包裹核酸通过特殊递送机制,把外源DNA、RNA、siRNA转入各类细胞,能转染贴壁细胞、悬浮细胞,还可用于siRNA和shRNA的基因敲除实验及基因表达研究。
过对近百种细胞对比测试,EZ Trans Lipo在绝大部分受检细胞的转染效率、细胞毒性表现均与进口型产品一致或更优;具备转染效率高、细胞毒性低、适用细胞广、性价比高等优点。
订购信息

产品名称货号规格价格
EZ Trans Lipo细胞转染试剂  (脂质体)AC04L0711 mL1300

运输与保存
蓝冰运输。4℃保存,有效期12个月。
使用方法
贴壁细胞293T细胞、96孔板为例
1.细胞准备
转染前一天用1酶消化、铺板,转染当天细胞密度达到3.0x105 个细胞/mL时可进行转染, 细胞汇合度达到70%-80%,保证活细胞>90%。
2.准备DNA-EZ Trans Lipo复合物
1)取两支无菌EP管(平行样),两个EP管各加入5 μL不含抗生素和血清的MEM细胞培养液,然后每一管各加入EZ Trans Lipo转染试剂0.15 μL,轻微吹吸使混和均匀。
2)取一支无菌EP管,加入10 μL不含抗生素和血清的MEM细胞培养液然后加入待转DNA或质粒,确保最终DNA量为0.2 μg,轻微吹吸使混和均匀。
3)分别吸取上述含有DNA的培养液5μL加入稀释好的EZ Trans Lipo的两个EP管, 轻轻吹打晃动使混和均匀,室温静置20 min形成DNA-EZ Trans Lipo 复合物(室温条件4 h内性质稳定)。
3.转染细胞
DNA-EZ Trans Lipo 复合物全部加入到96孔板贴壁培养的293细胞中试剂有重复样逐滴分散加入,轻微晃动。
4.细胞检测
加入DNA-EZ Trans Lipo复合物的细胞在 37℃ 培养1-3 d(无需特意更换培养液),根据实验设计实时观察或收获细胞检测。
 
1:不同培养体积对应的待转DNA、EZ Trans、稀释液用量

培养皿96孔板24孔板12孔板6孔板6cm皿10cm皿
推荐铺板个数/孔1-3x1040.5-2x1052-3x1050.5-1x1061-2x1062-4x106
推荐转染质粒总量ug/孔0.1μg0.5μg1μg2μg5μg10μg
转染试剂μL/孔0.15μL0.75μL1.5μL3.5μL7.5μL15μL
无血清培养基μL20μL50μL100μL200μL500μL1000μL

 
 
 
悬浮细胞(以293FT细胞、1mL培养体积为例)
1.细胞准备
细胞进行转染当天细胞密度达到2-2.5x106 /mL时可进行转染,细胞重悬汇合度达到70%-80%,保证细胞>90%。悬浮细胞细胞转染可当天接种/铺板, 只要细胞状态稳定即可进行
2.准备DNA-EZ Trans Lipo复合物
1)取两支无菌EP管(平行样),两个EP管各加入400μL不含抗生素和血清的MEM细胞培养液, 然每一管各加入EZ Trans Lipo转染试剂15μL,轻微吹吸使混和均匀。
2)取一支无菌EP管,加入800μL不含抗生素和血清的MEM细胞培养液,然后加入待转DNA或质粒,确保最终DNA量为20μg,轻微吹吸使混和均匀。
3)分别吸取将上述含有DNA的培养液400μL加入到稀释好的转染试剂培养液的两个EP管中, 轻轻吹打、晃动使混和均匀,室温静置20 min(室温条件4 h内性质稳定)。
3.转染细胞
DNA-EZ Trans Lipo复合物800μL全部加入到1 mL悬浮培养的293FT细胞中(有重复样)。逐滴分散加入,轻微晃动。
4.细胞检测
加入DNA-EZ Trans Lipo复合物的细胞,37℃ 悬培养细胞1-3 d(无需特意更换培养液),根据实验设计实时观察或收获细胞检测。
注意事项
1.本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
2.DNA-EZ Trans Lipo 的转染过程不要求特意更换,但由于双抗会影响重组蛋白的表达,为获得最佳表达效果,建议在细胞转染前2 h更换成不含抗生素和血清的培养基,在转后4-6 h换回含抗生素和血清的培养基。
3.质粒质量:请务必使用高质量转染级无内毒素质粒。通过260 nm光吸收测定DNA 浓度,260nm / 280nm比值确定 DNA 纯度(比值应该在1.8~2.0的范围之内)。如有可能,请通过琼脂糖凝胶电泳检测质粒的完整性。
4.细胞条件:使用适当保存和经常传代的健康细胞。确保培养基没有被细菌、真菌或支原体污染。如果细胞是近期复苏的液氮冻存细胞,请在转染前至少传代两次。建议使用GIBCO或者李记生物的特级胎牛血清(Foetal Bovine Serum)(货号:AC03L055)培养细胞。
5.为了减少操作误差,上述操作步骤设定了一个重复平行样,用户可根据实验室目的和实验室条件调整。
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