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PsmCas13b 酶产品简介:
规律成簇间隔短回文重复(CRISPR)在基因编辑过程中发挥了强大的生命力。其中,科学家掌握了对一种蛋白-Cas9的操作技术,并先后利用该技术对多种细胞的DNA进行了编辑。这种技术被称为CRISPR/Cas9基因编辑系统,迅速成为生命科学热门的技术。不像其他基因编辑手段,它使用起来廉价、迅速且简单,并因此席卷全球实验室。最近科学家发现CRISPR在核酸检测方面同样表现出了强大的生命力。本品为PsmCas13b 酶,产品经过纯化以确保其质量。
基于CRISPR Cas13的核酸检测原理:
CRISPR-Cas系统通过RNA引导的内切酶构成细菌的适应性免疫系统。该系统经过重新设计,创建了一个示例性的基因组编辑工具,用于基于RNA的治疗开发。PsmCas13b(Prevotella sp. MA2016-Cas13b)是一种CRISPR-Cas效应器,属于第2类VI-B亚型,已被证明能有效靶向和沉默不同的哺乳动物ssRNA病毒。Cas13b通过短和长的直接重复处理自己的CRISPR阵列,切割靶RNA,并表现出附带的RNase活性(图1)。
产品描述:
重组全长Prevotella sp. MA2016-Cas13b(PsmCasl3b)在大肠杆菌中表达。重组蛋白储存在50mM Tris pH7.5、600mM NaCl、2mM DTT、5%甘油中。
储存和稳定性:
在-80℃下储存产品。为了达到最佳储存效果,离心后将试剂分装冻存,并在推荐的温度下储存。为了获得最佳性能,避免重复冻融。
反应缓冲液成分:
200 mM HEPES PH 7.0、500 mM kCI、50 mM MgCl2、I mg/mL BSA。
报告底物:
合成的RNA寡核苷酸,寡核苷酸的两端分别标记荧光基团和淬灭基团。
检测方案:
Cas13b的RNA反式切割活性在基于CRISPR的荧光报告分析中检测到。RNA引导的RNA与Cas13b结合激活酶,诱导靶RNA切割以及侧支RNase活性。后者会导致在切割时发出光信号的报告底物降解。