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【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:游离胆固醇(FC)微量法测试盒
规格 : 100管/96样
测试方法: 微量法
货号:GOY-01S6644
分类:脂肪酸代谢系列
商品介绍:
胆固醇广泛存在于动物体内,尤以脑及神经组织中最为丰富,在肾、脾、皮肤、肝和胆汁中含量也高。胆固醇是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸等生理活性物质的重要原料,也是构成细胞膜的主要成分,其血清浓度可作为脂代谢的指标。动脉粥样硬化、静脉血栓形成与胆石症与高胆固醇血症有密切的相关性。
测定原理
游离胆固醇在胆固醇氧化酶作用下生成△4-胆甾烯酮和H2O2,H2O2在4-氨基安替比林和酚存在下,经过氧化物酶作用下生成红色醌类化合物,其颜色深浅与FC含量成正比。
自备用品
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、双蒸水。
试剂的组成和配制
提取液一:液体50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入40mL试剂四充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂二:液体18μL×1瓶,4℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存;
试剂四:液体50mL×1瓶, 4℃保存;
测定步骤
1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、 将试剂一、二、三37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热10分钟。
3、 加样表:
样本的前处理
①总FBP酶提取:建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一,冰浴匀浆后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定。
②胞浆和叶绿体FBP酶的分离:按照植物组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g样本,加入1mL提取液一),冰浴匀浆后于4℃,200g离心5min,弃沉淀,取上清在4℃,8000g离心10min,取上清用于测定胞浆FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震荡溶解后超声破碎(冰浴,200W,破碎3s,间歇7s,总时间1min),然后4℃,8000g离心10min,取上清测定叶绿体中FBP酶活性。
建议测定总FBP酶活性,按照步骤①提取粗酶液,若需要分别测定胞浆和叶绿体中的FBP,则按照步骤②提取粗酶液。
载脂蛋白B-mRNA编辑酶复合物3C抗体 组蛋白去甲基化酶JMJ2A抗体
载脂蛋白C1抗体 组蛋白去甲基化酶JARID2抗体
载脂蛋白C2抗体 组蛋白去甲基化酶JARID1B抗体
载脂蛋白L1抗体 组蛋白去甲基化Jarid1C抗体
载脂蛋白L4抗体 组蛋白连接作用蛋白抗体
大鼠白介素2受体α(IL2Rα)elisa检测试剂盒
大鼠白介素2受体β(IL2Rβ)elisa检测试剂盒
大鼠白介素3(IL-3)elisa分析检测试剂盒
大鼠白介素3(IL3)elisa检测试剂盒
大鼠白介素3(IL-3)elisa检测试剂盒
游离胆固醇(FC)微量法测试盒大提柱式真菌 RNAout5次 柱式鼠尾 DNAout50 次
细菌 RNAout100 次 柱式拭子 DNAout50 次
细菌 RNAout250 次 柱式石蜡包埋组织 DNAout30 次
葡萄球菌 RNAout50 次 柱式石蜡包埋组织 DNAout2.0(二代测序专用)50 次
分枝杆菌 RNAout50 次 柱式软体动物 DNAout50 次
FBP活性计算:
(1)按样本蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V样÷V样总) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反总:反应体系总体积,1×10-3 L;ε:NADPH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.1 mL;V样总:加入提取液体积,1mL;T:反应时间,5 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g。