辅酶ⅠNAD(H)含量微量法测试盒
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具体成交价以合同协议为准
2022-03-03 15:57:38
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属性:
供货周期:现货;规格:100管/48样;货号:GOY-01S6321;应用领域:化工;主要用途:公司产品仅供于科研使用;
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产品属性
供货周期
现货
规格
100管/48样
货号
GOY-01S6321
应用领域
化工
主要用途
公司产品仅供于科研使用
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上海谷研实业有限公司

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产品简介

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详细介绍

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产品名称规格 测试方法货号
辅酶ⅠNAD(H)含量微量法测试盒100管/48样微量法GOY-01S6321

商品介绍:

测定意义
辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循环(TCA)的主要氢受体,生成的NADH经呼吸电子链(ETC)传递把电子交给氧,在合成ATP的同时,形成大量的ROS,同时NADH再生为NAD+。糖、脂、蛋白质三大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于评价糖酵解和TCA循环的强弱。较高的NAD(H)及NADH/NAD+比值说明细胞呼吸耗氧量较高,处于过氧化状态。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循环。另外,NAD+降解产物对细胞信号传导、代谢和基因表达等具有重要的调控作用。
测定原理
分别用酸性和碱性提取液提取样品中NAD+和NADH,NADH通过PMS的递氢作用,还原氧化型噻唑蓝(MTT)为甲瓒,在570nm下检测吸光值;而NAD+可被乙醇脱氢酶还原为NADH,进一步采用MTT还原法检测。
需自备的仪器和用品
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

测定操作表:

QQ截图20220303155147.png

剂组成和配制:

提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

试剂三:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

试剂四:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

酶活性计算公式:

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

(1)按样本蛋白浓度计算:

酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫克组织蛋白每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量为一个酶活力单位(U)。

DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反总÷(V样×Cpr)÷T= 18×A460÷Cpr

(2)按样本质量计算:

酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每克组织每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。

DAO活性(nmol/min/g 鲜重)= ×V反总÷(V样÷V样总×W)÷T= 18×A460÷W

(3)按细胞数量计算:

酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每104个细胞每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。

DAO活性(nmol/min/104cell)= ×V反总÷(V样÷V样总×细胞数量)÷T= 18×A460÷细胞数量

(4) 按液体体积计算

酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫升血清每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。

DAO活性(nmol/min/mL)= ×V反总÷V样÷T= 18×A460

ε:氧化型邻联茴香胺毫摩尔消光系数:7.5 L/mmol/cm;d:比色皿光径,1cm;V反总:反应总体积,0.2mL;V样:反应中样本体积,0.05mL;V样总:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;T:反应时间,30min

b. 用96孔板测定的计算公式如下

(1)按样本蛋白浓度计算:

酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫克组织蛋白每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量为一个酶活力单位(U)。

DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反总÷(V样×Cpr)÷T= 36×A460÷Cpr

(2)按样本质量计算:

酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每克组织每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。

DAO活性(nmol/min/g 鲜重)= ×V反总÷(V样÷V样总×W)÷T= 36×A460÷W

(3)按细胞数量计算:

酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每104个细胞每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。

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干扰素诱导T-细胞α亚族趋化剂(ITαC)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Interferon Inducible T-Cell Alpha Chemoattractant (ITaC)    96T    Homo sapiens (Human)    

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辅酶ⅠNAD(H)含量微量法测试盒IFN- Gamma(Interferon Gamma)Human  干扰素-γ多肽抗原(人)     0.5mg    

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