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产品名称 | 规格 | 测试方法 | 货号 |
辅酶ⅠNAD(H)含量微量法测试盒 | 100管/48样 | 微量法 | GOY-01S6321 |
商品介绍:
测定意义
辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循环(TCA)的主要氢受体,生成的NADH经呼吸电子链(ETC)传递把电子交给氧,在合成ATP的同时,形成大量的ROS,同时NADH再生为NAD+。糖、脂、蛋白质三大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于评价糖酵解和TCA循环的强弱。较高的NAD(H)及NADH/NAD+比值说明细胞呼吸耗氧量较高,处于过氧化状态。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循环。另外,NAD+降解产物对细胞信号传导、代谢和基因表达等具有重要的调控作用。
测定原理
分别用酸性和碱性提取液提取样品中NAD+和NADH,NADH通过PMS的递氢作用,还原氧化型噻唑蓝(MTT)为甲瓒,在570nm下检测吸光值;而NAD+可被乙醇脱氢酶还原为NADH,进一步采用MTT还原法检测。
需自备的仪器和用品
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
测定操作表:
剂组成和配制:
提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂三:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂四:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
酶活性计算公式:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
(1)按样本蛋白浓度计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫克组织蛋白每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量为一个酶活力单位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反总÷(V样×Cpr)÷T= 18×A460÷Cpr
(2)按样本质量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每克组织每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性(nmol/min/g 鲜重)= ×V反总÷(V样÷V样总×W)÷T= 18×A460÷W
(3)按细胞数量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每104个细胞每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性(nmol/min/104cell)= ×V反总÷(V样÷V样总×细胞数量)÷T= 18×A460÷细胞数量
(4) 按液体体积计算
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫升血清每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性(nmol/min/mL)= ×V反总÷V样÷T= 18×A460
ε:氧化型邻联茴香胺毫摩尔消光系数:7.5 L/mmol/cm;d:比色皿光径,1cm;V反总:反应总体积,0.2mL;V样:反应中样本体积,0.05mL;V样总:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;T:反应时间,30min
b. 用96孔板测定的计算公式如下
(1)按样本蛋白浓度计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫克组织蛋白每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量为一个酶活力单位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反总÷(V样×Cpr)÷T= 36×A460÷Cpr
(2)按样本质量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每克组织每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性(nmol/min/g 鲜重)= ×V反总÷(V样÷V样总×W)÷T= 36×A460÷W
(3)按细胞数量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每104个细胞每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
补体成分8γ(C8γ)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Complement Component 8g (C8g) 96T Homo sapiens (Human)
博来霉素水解酶(BLMH)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Bleomycin Hydrolase (BLMH) 96T Homo sapiens (Human)
前梯度蛋白2(AGR2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Anterior Gradient Protein 2 (AGR2) 96T Homo sapiens (Human)
络丝蛋白(RL)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Reelin (RL) 96T Rattus norvegicus (Rat)
甲状腺激素反应基因(THRSP)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Thyroid Hormone Responsive (THRSP) 96T Homo sapiens (Human)
蛋白C抑制因子(PCI)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Protein C Inhibitor (PCI) 96T Homo sapiens (Human)
妊娠相关血浆蛋白A2(PAPPA2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Pappalysin 2 (PAPPA2) 96T Homo sapiens (Human)
补体成分1q子成分C(C1qC)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Complement Component 1, Q Subcomponent C (C1qC) 96T Homo sapiens (Human)
泛素羧基端酯酶L1(UCHL1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Ubiquitin Carboxyl Terminal Hydrolase L1 (UCHL1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
生长分化因子11(GDF11)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 11 (GDF11) 96T Rattus norvegicus (Rat)
生长分化因子5(GDF5)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 5 (GDF5) 96T Homo sapiens (Human)
生长分化因子5(GDF5)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 5 (GDF5) 96T Mus musculus (Mouse)
生长分化因子5(GDF5)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 5 (GDF5) 96T Rattus norvegicus (Rat)
生长分化因子3(GDF3)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 3 (GDF3) 96T Homo sapiens (Human)
生长分化因子3(GDF3)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 3 (GDF3) 96T Mus musculus (Mouse)
生长分化因子3(GDF3)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 3 (GDF3) 96T Rattus norvegicus (Rat)
生长分化因子1(GDF1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 1 (GDF1) 96T Homo sapiens (Human)
生长分化因子1(GDF1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 1 (GDF1) 96T Mus musculus (Mouse)
生长分化因子1(GDF1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 1 (GDF1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
干扰素诱导T-细胞α亚族趋化剂(ITαC)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Inducible T-Cell Alpha Chemoattractant (ITaC) 96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
干扰素诱导T-细胞α亚族趋化剂(ITαC)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Inducible T-Cell Alpha Chemoattractant (ITaC) 96T Homo sapiens (Human)
ZNF268 (zinc finger protein ZNF268)- middle (1c) 人锌指脂蛋白-1c(抗原) 0.5mg
IFN- Gamma(Interferon Gamma)Ag-mouse、rat 干扰素-γ多肽抗原(大、小鼠) 0.5mg
辅酶ⅠNAD(H)含量微量法测试盒IFN- Gamma(Interferon Gamma)Human 干扰素-γ多肽抗原(人) 0.5mg
IFN- Beta (Interferon Beta)Anti-mouse,rat 干扰素-β抗原 0.5mg
IFN- Beta (Interferon Beta) human 干扰素-β抗原 0.5mg
PSCA 前列腺干细胞抗原 0.5mg