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商品介绍:
磷脂酶C(EC 3.1.4.3)是一种水解甘油磷酸酯C3位点甘油磷酸酯键的脂类水解酶,广泛存在于微生物及动植物的组织和细胞中,在细胞代谢、细胞传递、生长发育等方面具有重要作用。
测定原理
磷脂酶C催化水解NPPC产生对硝基苯酚,在410nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、研钵、超速冷冻离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、恒温水浴锅。
产品名称 | 规格 | 测试方法 | 货号 |
磷脂酶C(PLC)可见分光光度法测试盒 | 50管/48样 | 可见分光光度法 | GOY-01S6651 |
剂组成和配制:
提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂三:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂四:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加1mL蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
测定操作表:
酶活性计算公式:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
(1)按样本蛋白浓度计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫克组织蛋白每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量为一个酶活力单位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反总÷(V样×Cpr)÷T= 18×A460÷Cpr
(2)按样本质量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每克组织每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性(nmol/min/g 鲜重)= ×V反总÷(V样÷V样总×W)÷T= 18×A460÷W
(3)按细胞数量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每104个细胞每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性(nmol/min/104cell)= ×V反总÷(V样÷V样总×细胞数量)÷T= 18×A460÷细胞数量
(4) 按液体体积计算
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫升血清每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性(nmol/min/mL)= ×V反总÷V样÷T= 18×A460
ε:氧化型邻联茴香胺毫摩尔消光系数:7.5 L/mmol/cm;d:比色皿光径,1cm;V反总:反应总体积,0.2mL;V样:反应中样本体积,0.05mL;V样总:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,g;T:反应时间,30min
b. 用96孔板测定的计算公式如下
(1)按样本蛋白浓度计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫克组织蛋白每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量为一个酶活力单位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反总÷(V样×Cpr)÷T= 36×A460÷Cpr
(2)按样本质量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每克组织每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
DAO活性(nmol/min/g 鲜重)= ×V反总÷(V样÷V样总×W)÷T= 36×A460÷W
(3)按细胞数量计算:
酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每104个细胞每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。
暗盒 (5×7 英寸 )1个 素溶液 ,100mg/mL10mL
暗盒 (8×10 英寸 )1个 黑色素细胞生长因子5mL
DNA 包被溶液100mL 黑色素细胞生长因子 - 不含 TPA5mL
X 光片 (5×7 英寸 )1盒 核酸印迹膜染液100mL
X 光片 (8×10 英寸 )1盒 核酸稀释液,测 OD 专用100mL
高 GC DNA 清除剂,PCR 级1.5mL 硅胶膜 DNA 离心吸附柱 ( 大提 )1套
MnCl2溶液,25mM,PCR 级5mL 硅基磁珠2mL
甲酰胺,PCR 级5mL 固相内毒素清除剂500g
MgSO4溶液,10mM,PCR 级5mL 固相内毒素清除剂100g
石蜡油,PCR 级10mL 固相 RNase 清除剂250mL
大鼠3-O-甲基多巴(3-OMD)elisa分析检测试剂盒
大鼠3-O-甲基多巴(3-OMD)elisa检测试剂盒
大鼠3-羟基3-甲基戊二酰A还原酶(HMGCR)elisa检测试剂盒
大鼠3-羟基-3-甲基戊二酰A合酶(HMGCS)elisa分析检测试剂盒
大鼠3-羟基-3-甲基戊二酰A合酶(HMGCS)elisa检测试剂盒
磷脂酶C(PLC)可见分光光度法测试盒大片段 DNA 分子量标准50μg 凝固血液 DNAout30 次
脉冲电泳 Marker( 酵母染色体 PFG)50 次 凝固血液 DNAout100 次
脉冲电泳 Marker(Lambda LadderPFG)50 次 镍柱介质2mL
脉冲电泳 Marker( 低范围 PFG)50 次 镍柱介质10mL
超螺旋 DNA 分子量标准100uL 尿道上皮细胞生长因子5mL
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