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产品名称:糖原磷酸化酶b(GPb)试剂盒价格
规格 : 50管/24样、50管/24样
测试方法:微量法、紫外分光光度法
货号:YS-01S6668
测定意义
糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代谢的关键酶,使糖原分子从非还原端逐个断开α-1,4-糖苷键移去葡萄糖基,释放1-磷酸葡萄糖,直至临近糖原分子α-1,6-糖苷键分支点前4个葡萄糖基处。GP分为有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和无活性的糖原磷酸化酶b(GPb)两种形式。GPb在一定浓度的腺苷酸(5,-AMP)存在下可被激活。
测定原理:
GP催化糖原和无机磷产生葡萄糖残基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步依次催化NADP还原生成NADPH,在340nm下测定NADPH上升速率,即可反映GP活性。添加一定浓度的腺苷酸(5,-AMP)时测定GP(GPa和GPb)活性,未添加腺苷酸(5,-AMP)时测定GPa活性,GP活性-GPa活性得到GPb活性。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 。
4 ). 加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
特点:
(1)应用广泛
由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)灵敏度高
由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致*是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用,在标准参考物质的研制中,它更受重视,很多光度分析法已制定成为标准方法。
(3)选择性好
目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。
(4)准确度高
对于一般的分光光度法来说,其浓度测量的相对误差在1-3%范围内,如采用示差分光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。
(5)适用浓度范围广
可从常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(经预富集后)。
(6)分析成本低、操作简便、快速
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
Anti-phospho-Synapsin I (Ser553) /FITC 荧光素标记磷酸化神经突触素1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
HSP-70 peptide 热休克蛋白-70(多肽抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
蛋白酪氨酸磷酸酶-1B/磷酸化酪氨酸抗体 Anti-PTP-1B/pTyr 0.1ml
Smad3 英文名称: 细胞信号转导分子SMAD3抗体 0.1ml
ENO1+ENO2+ENO3 英文名称: 神经元,肌肉特异性烯醇化酶抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-MK6 (Ser207) 磷酸化原活化蛋白激酶MKK6抗体 规格 0.1ml
HSP-70 peptide 热休克蛋白-70(多肽抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
HGF human 人肝生素Multi-class antibodies规格: 48T
Anti-Collagen III 抗Ⅲ型胶原抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh nonstructural protein 1/NS1 A型流感病毒-NS1抗体(神经氨酸酶1) 规格 0.2ml
Human myelin basic protein,MBP ELISA Kit 人髓磷脂碱性蛋白 96T
Triosephosphate isomerase 英文名称: 磷酸丙糖异构酶抗体 0.2ml
phospho-CXCR2 (Ser347) 英文名称: 磷酸化细胞表面趋化因子受体2抗体 0.2ml
Anti-Collagen III 抗Ⅲ型胶原抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Smad7 + Smad6 英文名称: Smad7抗体 0.1ml
Estrogen receptor alpha 英文名称: 雌受体α抗体 0.1ml
钠碘转运体蛋白抗体 Anti-NIS 0.1ml
Anti-Phospho-SHIP1 (Tyr1020) /FITC 荧光素标记磷酸化SH2结构含磷酸肌醇SHIP1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-p63 (Ser455) 磷酸化P63抑制基因抗体 规格 0.1ml
IKI3 family protein Multi-class antibodies规格: 0.5mg
糖原磷酸化酶b(GPb)试剂盒价格2-甲基(MeTHF)(Standard for GC,≥99.5%(GC))赖诺普利0.2摩尔基质金属蛋白酶2/9抑制剂卡托普利(captopril)
异戊烷(Standard for GC,≥99.7%(GC))富马酸喹硫平 基质金属蛋白酶1抑制剂
烯酸甲酯(MA)(Standard for GC,>99%(GC))氨磷汀尿酶(UROKINASE)活性荧光定量检测试剂盒
丁酸甲酯(Standard for GC,>99.5%(GC))曲昔匹特组织尿酶(UROKINASE)活性荧光定量检测试剂盒
α-甲基烯酸(Standard for GC)盐酸萘替芬血液尿酶(UROKINASE)活性荧光定量检测试剂盒
乙二甲(standard for GC,>99.7%(GC))碳酸钙体液尿酶(UROKINASE)活性荧光定量检测试剂盒
N-甲基吡咯烷酮(NMP)(standard for GC,≥99.6%(GC))甲磺酸氨氯地平尿酶(UROKINASE)活性比色法定量检测试剂盒
异丁(standard for GC,≥99.5%(GC))伏格列波糖组织尿酶(UROKINASE)活性比色法定量检测试剂盒