【友情提示】：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失，请仔细阅读购买说明！

产品名称：辅酶ⅡNADP(H)含量测试盒规格

规格 : 50管/24样、100管/48样

测试方法:微量法、可见分光光度法

货号：YS-01S6334

测定意义

辅酶ⅡNADP(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，NADP+和NADPH含量测定可以计算NADP（NADPH + NADP+ )含量和NADPH/NADP+比值，其变化与磷酸戊糖途径和生物合成以及抗氧化反应密切相关。NADPH/NADP+比值不仅是细胞氧化还原态的主要标志之一，而且在PPP途径、生物合成和抗氧化代谢中具有重要调控作用。

测定原理

分别用酸性和碱性提取液提取样品中NADP+和NADPH。NADPH通过PMS的递氢作用，使氧化型噻唑蓝（MTT）还原为甲瓒，570nm下检测吸光值，从而测定NADPH含量。利用6-磷酸葡萄糖脱氢酶还原NADP+为NADPH，从而检测NADP+含量。

所需的仪器和用品

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

样品制备：

1）. 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品，体积可达2.000ml。

2）. 过滤混浊溶液。

3）. 除去样品中的CO 2 。

4 ）. 加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。

5 ）. 调整酸性浅色样品的PH值至8.0，孵育约15分钟。

6 ）. 用空白样品做对照测定有色样品（如有必要调整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。

8 ）. 压碎、搅匀固体或半固体样品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。

10）.含脂肪的样品用热水提取。

特点:

(1)应用广泛

由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)灵敏度高

由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致*是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用,在标准参考物质的研制中,它更受重视,很多光度分析法已制定成为标准方法。

(3)选择性好

目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。

(4)准确度高

对于一般的分光光度法来说,其浓度测量的相对误差在1-3%范围内,如采用示差分光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。

(5)适用浓度范围广

可从常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(经预富集后)。

(6)分析成本低、操作简便、快速

Anti-p53BP1/53BP1/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠p53结合蛋白1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Mouse Anti-Goat IgM/ Biotin 生物素化小鼠抗羊IgMMulti-class antibodies规格： 0.3ml

C-藻蓝素/藻蓝蛋白抗体 Anti-C-PC 0.1ml

Rabbit Anti-pig IgG/Bio 生物素标记的兔抗猪IgG 0.1ml

FARSLA/CML33 英文名称： 慢性粒细胞白血病33抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh PI3 Kinase p110 delta 磷脂酰肌醇激酶催化亚单位D抗体 规格 0.1ml

Mouse Anti-Goat IgM/ Biotin 生物素化小鼠抗羊IgMMulti-class antibodies规格： 0.3ml

IFN- Gamma(Interferon Gamma)Ag-mouse、rat 干扰素-γ多肽抗原(大、小鼠)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-CDC42 细胞分化周期CDC42蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh OMPC 大肠杆菌外膜孔道蛋白C抗体 规格 0.1ml

CST1 Kit Human 人 Cystatin SN / CST1 ELISA配对抗体 ELISA

TTC8 英文名称： 巴尔得-别德尔综合征相关蛋白8抗体 0.1ml

C6orf222 英文名称： 6号染色体开放阅读框222抗体 0.2ml

Anti-CDC42 细胞分化周期CDC42蛋白抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

rSec6 英文名称： 胞吐分泌蛋白Sec6抗体 0.2ml

EGFRvIII 英文名称： 表皮生长因子受体III型突变体抗体 0.1ml

血小板源性生长因子-A抗体 Anti-PDGF-A 0.1ml

Anti-52KDa Ro/SSA /FITC 荧光素标记核糖核蛋白抗原52kD-Ro/SSA抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-NEDD4L (Ser342) 磷酸化泛素连接酶NEDD4-2抗体 规格 0.1ml

FoxP3 叉头蛋白3-T细胞转录因子(多肽抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg
辅酶ⅡNADP(H)含量测试盒规格胡椒碱骨碎补冻切片组织GSK-3ALPHA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒

胡椒碱(标准品)青黛石蜡切片组织GSK-3ALPHA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒

纽莫康定B0(肺囊康定) 猪牙皂 载玻片GSK-3ALPHA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒

福莫特罗 紫苏梗 冻切片组织GSK-3ALPHA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒

溴甲后马托品鸡血藤 石蜡切片组织GSK-3ALPHA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒

乙酸阿比特龙酯闹洋花 GSK-3ALPHA蛋白表达比色法定量检测试剂盒

溴莫尼定 葛根(甘葛藤) GSK-3ALPHA蛋白表达荧光定量检测试剂盒

磺草灵爵床 GSK-3ALPHA蛋白表达西方杂交分析试剂盒
操作步骤:

实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

4.        每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。

7.       依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。