【友情提示】：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失，请仔细阅读购买说明！

产品名称：游离胆固醇（FC）含量测试盒说明书

规格 : 50管/48样、100管/96样

测试方法:微量法、可见分光光度法

货号：YS-01S6483

测定意义

胆固醇广泛存在于动物体内，尤以脑及神经组织中最为丰富，在肾、脾、皮肤、肝和胆汁中含量也高。胆固醇是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸及维生素等生理活性物质的重要原料，也是构成细胞膜的主要成分，其血清浓度可作为脂代谢的指标。动脉粥样硬化、静脉血栓形成与胆石症与高胆固醇血症有密切的相关性。

测定原理

游离胆固醇在胆固醇氧化酶作用下生成△4-胆甾烯酮和H2O2，H2O2在4-氨基安替比林和酚存在下，经过氧化物酶作用下生成红色醌类化合物，其颜色深浅与FC含量成正比。

自备用品

可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、双蒸水。

样品制备：

1）. 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品，体积可达2.000ml。

2）. 过滤混浊溶液。

3）. 除去样品中的CO 2 。

4 ）. 加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。

5 ）. 调整酸性浅色样品的PH值至8.0，孵育约15分钟。

6 ）. 用空白样品做对照测定有色样品（如有必要调整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。

8 ）. 压碎、搅匀固体或半固体样品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。

10）.含脂肪的样品用热水提取。

特点:

(1)应用广泛

由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)灵敏度高

由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致*是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用,在标准参考物质的研制中,它更受重视,很多光度分析法已制定成为标准方法。

(3)选择性好

目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。

(4)准确度高

对于一般的分光光度法来说,其浓度测量的相对误差在1-3%范围内,如采用示差分光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。

(5)适用浓度范围广

可从常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(经预富集后)。

(6)分析成本低、操作简便、快速

F1 operon positive regulatory protein(CT) 鼠疫耶尔森氏菌F1荚膜蛋白(C端多肽)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

丁酰胆碱脂酶抗体(C端) Anti-BCHECT 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-EGFR (Ser1045) 磷酸化表皮生长因子受体抗体 规格 0.1ml

新生血清 200ml 四季青

ZNF266 英文名称： 锌指蛋白266抗体 0.2ml

DCL-1 英文名称： C型凝集素受体CLEC13A抗体 0.1ml

丁酰胆碱脂酶抗体(C端) Anti-BCHECT 0.1ml

UTS2R/GPR14(Urotensin II receptor：G Protein Coupled Receptor 14) G蛋白偶联受体14抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

PLAUR PLAUR / CD87 / uPAR 鼠单抗 (PE) Human

Rhesus antibody Rh phospho-CSF1R(Tyr923) 磷酸化巨噬细胞集落刺激因子受体抗体 规格 0.1ml

考马斯亮蓝R-250蛋白快速染色液 250ml 自产

ZNF347 英文名称： 锌指蛋白347抗体 0.2ml

DAT1 英文名称： 神经细胞特异性转录因子DAT1抗体 0.2ml

PLAUR PLAUR / CD87 / uPAR 鼠单抗 (PE) Human

ZADH1 英文名称： 锌结合乙醇脱氢酶结构域蛋白1抗体 0.2ml

DYRK1A 英文名称： 丝酸/苏酸蛋白激酶MNB抗体 0.2ml

衔接蛋白β抗体 Anti-beta Adaptin/AP2 0.1ml

Anti-Gentamicin Monoclonal Antibody /Gold 胶体金离子标记小鼠抗庆大霉素单克隆抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.5ml(35nm-40nm)

Rhesus antibody Rh phospho-ER-beta(ser87) 磷酸化雌受体β抗体 规格 0.1ml

Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(rat) 防御素β2抗原(大鼠)Multi-class antibodies规格： 0.5mg
游离胆固醇（FC）含量测试盒说明书氘代乙(25 mL )10-姜酚全组织组织化学HRP酶联DAB*间接检测试剂盒（含一抗和HRP二抗）

氘代乙(25g )石斛碱全组织组织化学HRP酶联DAB直接检测试剂盒（含HRP一抗）

氘代乙(50g )雷公藤内酯酮全组织组织化学AP酶联NBT/BCIP基础检测试剂盒（无一抗和二抗）

氘代甲苯(5 g )异阿魏酸全组织组织化学AP酶联NBT/BCIP间接检测试剂盒（含AP二抗）

氘代甲苯(10 g )豆甾全组织组织化学AP酶联NBT/BCIP*间接检测试剂盒（含一抗和AP二抗）

氘代甲苯(25 g )芒柄花苷全组织组织化学AP酶联NBT/BCIP直接检测试剂盒（含AP一抗）

氘代酮(0.50mlx10)没食子儿茶素全组织荧光显微镜基础检测试剂盒（无一抗和二抗）

氘代酮(0.50mlx10)牡荆素葡萄糖苷全组织荧光显微镜间接检测试剂盒（含荧光二抗）
操作步骤:

实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

4.        每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。

7.       依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。