产品名称：双缩脲法蛋白含量测试盒说明书

规格 : 50管/48样、100管/96样

测试方法:微量法、可见分光光度法

货号：YS-01S6675

测定意义

强碱性溶液中，双缩脲与CuSO4形成紫色络合物；紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。该方法测定范围为1~10mg蛋白质，适用于蛋白质浓度高的样品，尤其是动物材料。

试剂组成和配置

1、双缩脲试剂×1瓶，4℃保存；

2、10mg/ml标准蛋白×1支，-20℃保存；

3、标准蛋白配制：取10mg/ml标准蛋白100μl加双蒸水100μl，即得5mg/ml标准蛋白溶液。

【友情提示】：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失，请仔细阅读购买说明！

样品制备：

1）. 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品，体积可达2.000ml。

2）. 过滤混浊溶液。

3）. 除去样品中的CO 2 。

4 ）. 加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。

5 ）. 调整酸性浅色样品的PH值至8.0，孵育约15分钟。

6 ）. 用空白样品做对照测定有色样品（如有必要调整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。

8 ）. 压碎、搅匀固体或半固体样品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。

10）.含脂肪的样品用热水提取。

特点:

(1)应用广泛

由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)灵敏度高

由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致*是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用,在标准参考物质的研制中,它更受重视,很多光度分析法已制定成为标准方法。

(3)选择性好

目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。

(4)准确度高

对于一般的分光光度法来说,其浓度测量的相对误差在1-3%范围内,如采用示差分光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。

(5)适用浓度范围广

可从常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(经预富集后)。

(6)分析成本低、操作简便、快速

操作步骤:

实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

4.        每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。

7.       依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。

Anti-P38 MAPK/RBITC 红色荧光素罗丹明(RBITC)标记原活化蛋白激酶p38抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

rec Protein G/HRP 辣根过氧化物酶标记的重组蛋白GMulti-class antibodies规格： 0.1ml

肝细胞生长因子受体抗体 Anti-C-Met/HGFR 0.1ml

Rabbit Anti-Monkey IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗猴IgG 0.1ml

Phospho-FoxO3a (Ser318 + Ser321) 英文名称： 磷酸化叉头蛋白3A抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh PILR beta 细胞表面受体PILRβ抗体 规格 0.2ml

rec Protein G/HRP 辣根过氧化物酶标记的重组蛋白GMulti-class antibodies规格： 0.1ml

HPV18 E6 人类状瘤病毒18抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-ABCB6 ATP结合蛋白家族6抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-CHK2 (Thr68) 磷酸化细胞周期检测点激酶2抗体 规格 0.1ml

兔抗豚鼠IgG血清 0.5ml 国产

WNT7A 英文名称： 原癌基因wnt7a蛋白抗体 0.1ml

Phospho-DOK2 (Tyr142) 英文名称： 磷酸化D酪酸激酶衰减蛋白2抗体 0.1ml

Anti-ABCB6 ATP结合蛋白家族6抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

phospho-SHC (Tyr427) 英文名称： 磷酸化SH2结构域转化蛋白1抗体 0.1ml

EBNA 3B 英文名称： EB病毒核抗原-3B抗体 0.2ml

CD40L抗体 Anti-CD40L 0.1ml

Mouse Anti-human VEGF/FITC 荧光素标记小鼠抗人VEGF单克隆抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-GNA12(Ser68) 磷酸化鸟苷酸调节蛋白12抗体 规格 0.1ml

Cdc34 peptide 细胞周期调控因子34抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg
双缩脲法蛋白含量测试盒说明书二甲氯(标准品)罗格列酮组织AURORA-A酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

油酸甲酯(分析标准品,>99.0%(GC))草酸艾司西酞普兰AURORA-B酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

烯酸甲酯（MA）(分析标准品,≥99.5%(GC))依西美坦组织AURORA-B酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

丁酸甲酯(分析标准品,≥99.5%(GC),用于环境分析)依西美坦中间体（雄烯二酮）AURORA-C酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

3-甲基胆蒽标准溶液(100 ng/μL ,基体：乙)盐酸曲美他组织AURORA-C酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

异丁(分析标准品,≥99.8%(GC))孟鲁司特钠ERK1/2酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

乙酸甲酯(分析标准品,99.9%（GC))S-孟鲁司特钠组织ERK1/2酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

二乙二二甲(分析标准品,≥99.7%(GC))盐酸氨酮戊酸P38a酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）