【友情提示】：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失，请仔细阅读购买说明！

产品名称：吡咯啉-5-羧酸合成酶（P5CS）测试盒说明书

规格 : 50管/24样、100管/48样

测试方法:微量法、可见分光光度法

货号：YS-01S6423

测定意义

脯氨酸是植物体内适应逆境胁迫的一种重要的渗透调节物质。高等植物中脯氨酸代谢因其初始底物不同，分为谷氨酸( Glu) 和鸟氨酸( Orn) 两条合成途径。吡咯啉-5-羧酸合成酶（P5CS， Δ1-pyrroline-5-carboxylate synthetase）是以谷氨酸为前体合成脯氨酸途径的关键酶，对植物适应逆境胁迫起关键作用。

测定原理：

吡咯啉-5-羧酸合成酶催化谷氨酸生成P5C过程中分解ATP生成ADP和无机磷，通过钼酸铵比色法测定单位时间内产生无机磷的量可确定P5CS活性。

需自备的仪器和用品：

可见外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

样品制备：

1）. 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品，体积可达2.000ml。

2）. 过滤混浊溶液。

3）. 除去样品中的CO 2 。

4 ）. 加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。

5 ）. 调整酸性浅色样品的PH值至8.0，孵育约15分钟。

6 ）. 用空白样品做对照测定有色样品（如有必要调整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。

8 ）. 压碎、搅匀固体或半固体样品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。

10）.含脂肪的样品用热水提取。

特点:

(1)应用广泛

由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)灵敏度高

由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致*是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用,在标准参考物质的研制中,它更受重视,很多光度分析法已制定成为标准方法。

(3)选择性好

目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。

(4)准确度高

对于一般的分光光度法来说,其浓度测量的相对误差在1-3%范围内,如采用示差分光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。

(5)适用浓度范围广

可从常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(经预富集后)。

(6)分析成本低、操作简便、快速

Anti-TCF7L2/FITC 荧光素标记转录因子7类似物2抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Leptin 瘦素(多肽抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

分泌型卷曲相关蛋白1抗体 anti-SFRP1 0.2ml

Phospho-Syk (Tyr525 + Tyr526) 英文名称： 磷酸化非受体型酪酸蛋白激酶抗体 0.1ml

E2F7 英文名称： 转录调节因子E2F7抗体 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-MEF2A (Thr312) 磷酸化肌细胞增强因子2抗体 规格 0.1ml

Leptin 瘦素(多肽抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Leptin 瘦素(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-CD2 CD2抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PAI-2/SerpinB2 纤溶酶原激活物抑制因子2抗体(血浆酶原激活酶抑制因子-2) 规格 0.1ml

COQ7 Kit Human 人 COQ7 ELISA配对抗体 ELISA

Tsg101 英文名称： 易感基因101蛋白抗体 0.1ml

C6orf150 英文名称： 6号染色体开放阅读框150抗体 0.1ml

Anti-CD2 CD2抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

SRRM2 英文名称： 丝酸/精酸相关核基质蛋白2抗体 0.1ml

phospho-EGFR (Tyr1016) 英文名称： 磷酸化表皮生长因子受体抗体 0.1ml

样物质结合蛋白/细胞粘附分子样蛋白抗体 Anti-OPCML 1ml

Anti-Phospho-SMC1 (Ser360) /FITC 荧光素标记磷酸化染色体结构维持蛋白质1抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-NMDAR2B (Tyr1336) 磷酸化谷氨酸受体2B抗体 规格 0.1ml

c-erbB-2蛋白 c-erbB-2蛋白(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg
吡咯啉-5-羧酸合成酶（P5CS）测试盒说明书草酸一水(>98%,BC)黄芩素 组蛋白H2A-T120磷酸化检测试剂盒

过酸(>99%,BR)秦皮素 组蛋白H2A-T129磷酸化检测试剂盒

氢钠一水(>98%,BR)秦皮甲素 组蛋白H3-T3磷酸化检测试剂盒

硫酸钠十水(>99%,BC)秦皮乙素 组蛋白H3-T11磷酸化检测试剂盒

司班40绿原酸 组蛋白H3-T45磷酸化检测试剂盒

盐酸酪新绿原酸 组蛋白H3-S10磷酸化检测试剂盒

糠酸(>97%，BR)隐绿原酸 组蛋白H3-S28磷酸化检测试剂盒

2-甲基咪唑(>98%,BR)异绿原酸A 组蛋白H3-S31磷酸化检测试剂盒
操作步骤:

实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

4.        每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。

7.       依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。