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【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:淀粉磷酸化酶(SP)测试盒价格
规格 : 50管/48样、100管/96样
测试方法:微量法、紫外分光光度法
货号:YS-01S6504
测定意义
淀粉磷酸化酶(Starch Phosphorylase,SP)是淀粉代谢过程的可逆反应酶,既可催化淀粉的合成,也可催化淀粉的分解。
在高等植物中,淀粉磷酸化酶(合成方向)主要存在于质体中,负责延长淀粉的 α-1,4-葡萄糖链的非还原末端;淀粉磷酸化酶(分解方向)主要存在于细胞质基质中,催化淀粉中的α-1,4-糖苷键磷酸解产生葡萄糖-1-磷酸,负责葡萄糖链的磷酸解,是淀粉代谢过程中的关键酶。
在植物体中,淀粉磷酸化酶分解方向的底物无机磷浓度比合成方向的底物葡萄糖-1-磷酸浓度几乎高了两个数量级,一般认为淀粉磷酸化酶只催化淀粉的分解,因此,分解方向的淀粉磷酸化酶具有重要测定意义。
测定原理:
淀粉磷酸化酶催化淀粉中的α-1,4-糖苷键与无机磷反应产生葡萄糖-1-磷酸,葡萄糖-1-磷酸在磷酸葡萄糖变位酶的作用下产生葡萄糖-6-磷酸,并在6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化下还原NADP+产生NADPH,使340nm下吸光值增加。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 。
4 ). 加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
特点:
(1)应用广泛
由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)灵敏度高
由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致*是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用,在标准参考物质的研制中,它更受重视,很多光度分析法已制定成为标准方法。
(3)选择性好
目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。
(4)准确度高
对于一般的分光光度法来说,其浓度测量的相对误差在1-3%范围内,如采用示差分光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。
(5)适用浓度范围广
可从常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(经预富集后)。
(6)分析成本低、操作简便、快速
Anti-Phospho-PKC gamma (Thr514)/FITC 荧光素标记磷酸化蛋白激酶C亚型G抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Mouse Anti-Human Mu chain Monoclonal 鼠抗人IgM μ链单克隆抗体(亲和层析纯化)Multi-class antibodies规格: 1mg
鼠抗人β亚基人绒毛膜促性腺单抗 Anti-β-HCG 0.1ml
Dog IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的兔抗犬IgM抗体 0.1ml
FAM150A 英文名称: FAM150A蛋白抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-RPS6KB1(Thr 412) 磷酸化核糖体S6蛋白激酶抗体 规格 0.1ml
Mouse Anti-Human Mu chain Monoclonal 鼠抗人IgM μ链单克隆抗体(亲和层析纯化)Multi-class antibodies规格: 1mg
ZNF300 (zinc finger protein ZNF300)- middle 锌指蛋白300(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5ml
Anti-CD339/Jagged1 Jagged1/CD339抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh OPG 骨保护蛋白/护骨素抗体 规格 0.1ml
RELT Kit Human 人 RELT / TNFRSF19L ELISA配对抗体 ELISA
Tuftsin 英文名称: Tuftsin蛋白抗体 0.2ml
CRMP1 英文名称: 二氢嘧啶酶相关蛋白1抗体 0.1ml
Anti-CD339/Jagged1 Jagged1/CD339抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml
14-3-3 gamma 英文名称: 14-3-3γ抗体 0.2ml
EBF1 英文名称: 早期B细胞因子1抗体 0.2ml
piwi样1蛋白抗体 Anti-PIWIL1 0.1ml
Anti-phospho-STAT3 (Ser727) /FITC 荧光素标记磷酸化信号转导和转录激活因子3抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-MYL(Ser19) 磷酸化肌球蛋白轻链2抗体 规格 0.1ml
ANP(atrial natriuretic peptide) 心钠肽(心钠素)抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
淀粉磷酸化酶(SP)测试盒价格茜素黄GG联苯菊酯 标准品 CAS号:82657-04-3 100mg腺苷脱氨酶(ADA)定量检测试剂盒
茜素黄R苄呋菊酯 标准品 CAS号:28434-01-7腺苷脱氨酶(ADA)定量检测试剂盒
铝试剂,玫红三羧酸铵联苯 标准品 CAS号:92-52-4腺苷脱氨酶(ADA)定量检测试剂盒
铝试剂联苯三唑 标准品 CAS号:55179-31-2酵母腺苷脱氨酶(ADA)定量检测试剂盒
酸性铬蓝K硫氯酚 标准品 CAS号:97-18-75’-核苷酸酶(5’-NT)活性比色法定量检测试剂盒
酸性品红啶酰菌 标准品 CAS号:188425-85-6组织5’-核苷酸酶(5’-NT)活性比色法定量检测试剂盒
茜素络合指示剂(IND)溴鼠 标准品 CAS号:56073-10-0血液5’-核苷酸酶(5’-NT)活性比色法定量检测试剂盒
茜素络合指示剂(高纯级,98%)除草定标准品 CAS号: 314-40-9α-L-岩藻糖苷酶(AFU)比色法定量检测试剂盒
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。