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【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称:磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)测试盒价格
规格 : 50管/48样、100管/96样
测试方法:微量法、紫外分光光度法
货号:YS-01S6464
测定意义
PEPC(EC 4.1.1.31)广泛存在于动物、植物、微生物和细胞中,是催化磷酸烯醇式丙酮酸与二氧化碳反应生成草酰乙酸呈不可逆反应的酶,对三羧酸循环的运转起重要调节作用。
测定原理:
PEPC催化磷酸烯醇式丙酮酸和CO2生成草酰乙酸和HPO42-,苹果酸脱氢酶进一步催化草酰乙酸和NADH生成苹果酸和NAD+,在340nm测定NADH减少速率,计算PEPC活性。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
样品制备:
1). 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品,体积可达2.000ml。
2). 过滤混浊溶液。
3). 除去样品中的CO 2 。
4 ). 加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。
5 ). 调整酸性浅色样品的PH值至8.0,孵育约15分钟。
6 ). 用空白样品做对照测定有色样品(如有必要调整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。
8 ). 压碎、搅匀固体或半固体样品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。
10).含脂肪的样品用热水提取。
特点:
(1)应用广泛
由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)灵敏度高
由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致*是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用,在标准参考物质的研制中,它更受重视,很多光度分析法已制定成为标准方法。
(3)选择性好
目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。
(4)准确度高
对于一般的分光光度法来说,其浓度测量的相对误差在1-3%范围内,如采用示差分光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。
(5)适用浓度范围广
可从常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(经预富集后)。
(6)分析成本低、操作简便、快速
Anti-Paxillin/FITC 荧光素标记桩蛋白Paxillin抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rabbit Anti-human IgG/FITC 荧光素标记兔抗人IgGMulti-class antibodies规格: 0.3ml
细胞外基质蛋白1抗体 Anti-ECM1 0.2ml
Rabbit Anti-human sIgA/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的兔抗人分泌型IgA 0.1ml
FGFBP1 英文名称: 纤维细胞生长因子结合蛋白抗体 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-TERT(Ser1125) 磷酸化端粒酶逆转录酶抗体 规格 0.1ml
Rabbit Anti-human IgG/FITC 荧光素标记兔抗人IgGMulti-class antibodies规格: 0.3ml
NADPH peptide 还原型Ⅱ抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Anti-AQP4 水通道蛋白-4抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-ATG4D(Ser341) 磷酸化自噬相关蛋白4D抗体 规格 0.1ml
山羊抗大鼠 IgG(H+L)/HRP 0.1ml 美国公司分装
VGLL3 英文名称: 转录辅助因子退变样蛋白3抗体 0.2ml
DIRAS1 英文名称: RAS相关抑细胞生长蛋白1抗体 0.2ml
Anti-AQP4 水通道蛋白-4抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml
STK40 英文名称: 丝酸/苏酸蛋白激酶40抗体 0.2ml
ETV2 英文名称: ETS相关蛋白71抗体 0.2ml
XIAP相关因子1抗体 anti-XAF1 0.2ml
Anti-TSLP/FITC 荧光素标记细胞生成素-1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-IKK beta(S474) 磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗体 规格 0.1ml
active Caspase 3(caspase-3 p12 subunit) 活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg
磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)测试盒价格十二烯基丁二酸酐(>98%,BR)白当归脑BCL2(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)
癸二酸(>96%,BR)新橙皮苷二氢查尔酮 Caspase 1 (抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)
脱氢乙酸(>98%,BR)马钱苷酸 Caspase-2-G(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)
脱羰秋水仙碱仙鹤草酚BCaspase-3(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)
DON素,呕吐素;脱氧雪腐镰刀菌烯(>98%(HPLC),BR)升麻-3-O-β-D-吡喃木糖苷 Caspase-4 p20(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)
第威德合金牡荆素鼠李糖苷 Caspase 6(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)
二乙酰一肟(>98%,BR)牡荆素 Caspase-7(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)
二丁基二月桂酸锡(>95%,BR)20(R)人参g3 Caspase-8(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。