产品名称：ATP-柠檬酸裂解酶（ACL）测试盒说明书

规格 : 50管/48样、100管/96样

测试方法:微量法、紫外分光光度法

货号：YS-01S6491

测定意义

ACL（EC4.1.3.8）是脂肪酸合成中的关键酶，其催化产生的乙酰辅酶可用于脂肪酸合成和碳链延长、黄酮类物质合成、氨基酸合成等。

测定原理：

ACL在ATP和辅酶存在的情况下催化柠檬酸裂解为乙酰辅酶、草酰乙酸、腺苷二磷酸和磷酸盐。苹果酸脱氢酶进一步催化草酰乙酸和NADH生成苹果酸和NAD+，在340nm测定NADH减少速率，计算ACL活性。

需自备的仪器和用品：

紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水

【友情提示】：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失，请仔细阅读购买说明！

样品制备：

1）. 直接或稀释使用清亮无色中性液体样品，体积可达2.000ml。

2）. 过滤混浊溶液。

3）. 除去样品中的CO 2 。

4 ）. 加氢氧化钾或氢氧化钠将酸性样品的PH值调至8.0。

5 ）. 调整酸性浅色样品的PH值至8.0，孵育约15分钟。

6 ）. 用空白样品做对照测定有色样品（如有必要调整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺处理深色未经稀释或体积更大的样品。

8 ）. 压碎、搅匀固体或半固体样品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez试剂将含有蛋白质的样品去蛋白。

10）.含脂肪的样品用热水提取。

特点:

(1)应用广泛

由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。

(2)灵敏度高

由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致*是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用,在标准参考物质的研制中,它更受重视,很多光度分析法已制定成为标准方法。

(3)选择性好

目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。

(4)准确度高

对于一般的分光光度法来说,其浓度测量的相对误差在1-3%范围内,如采用示差分光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。

(5)适用浓度范围广

可从常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(经预富集后)。

(6)分析成本低、操作简便、快速

操作步骤:

实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

4.        每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。

7.       依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。

Anti-P27/kip1 /FITC 荧光素标记P27抗体/周期素依赖激酶抑制剂IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

rec Protein A/HRP 辣根过氧化物酶标记的重组蛋白AMulti-class antibodies规格： 0.1ml

酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗体 CKIP-1 0.1ml

Rabbit Anti-rat IgG/Cy5 Cy5标记的兔抗大鼠IgG 0.1ml

Phospho-FoxO1 (Ser319) 英文名称： 磷酸化叉头蛋白家族1抗体 0.1ml

Rhesus antibody Rh Pin1 肽基脯氨酞顺反异构酶Pinl抗体 规格 0.1ml

rec Protein A/HRP 辣根过氧化物酶标记的重组蛋白AMulti-class antibodies规格： 0.1ml

phospho-heterochromatin protein 1 (pTyr41)peptide 异染色质蛋白1(磷酸化多肽)Multi-class antibodies规格： 0.5mg

Anti-ABCD1/CCL22 嗜酸粒细胞趋化蛋白22抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-c-Jun(Ser243) 磷酸化原癌基因c-Jun抗体 规格 0.1ml

兔抗猴IgG血清 0.5ml 国产

WNT5A 英文名称： 信号通路Wnt5a抗体 0.1ml

Phospho-DBC1 (Tyr454) 英文名称： 磷酸化膀胱癌缺失基因1抗体 0.1ml

Anti-ABCD1/CCL22 嗜酸粒细胞趋化蛋白22抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml

TRIM21 英文名称： 核糖核蛋白抗原抗体 0.2ml

EID1 英文名称： 乙酰基转移酶EID1抗体 0.2ml

CD7抗体 Anti-CD7 0.1ml

Anti-VEGF-D/FIGF/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠血管内皮生长因子D型VEGFD抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-GPS1/CSN1(Ser474) 磷酸化G蛋白通路抑制蛋白1抗体 规格 0.1ml

Cdc2/P34CDC2/CDK1(Cell division control protein 2) 周期素依赖激酶1抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg
ATP-柠檬酸裂解酶（ACL）测试盒说明书氘代DMSO-D6(0.6ml x 10 )桑皮苷C柠檬酸化学法冻切片抗原修复处理试剂盒

氘代DMSO-D6(10 g )基苯酞柠檬酸化学法冻组织抗原修复处理试剂盒

氘代DMSO-D6(10 g )甲基莲心碱PRONASE酶解法石蜡切片抗原修复处理试剂盒

氘代DMSO-D6(50 g )新穿心莲内酯PEPCIN酶解法石蜡切片抗原修复处理试剂盒

氘代DMSO-D6(50 g )氧化芍药苷PROTEINASE K酶解法石蜡切片抗原修复处理试剂盒

氘代DMSO-D6(100g )茯苓酸胰蛋白酶（TRYPSIN）酶解法石蜡切片抗原修复处理试剂盒

N,N-二甲酰-d1(1g )伪金丝桃素PROTEASE酶解法石蜡切片抗原修复处理试剂盒

N,N-二甲酰-d1(5g )大黄酸-8-O-β-D-葡萄糖苷物理法石蜡切片抗原修复处理试剂盒