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正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
商品属性:
产品名称 | 规格 | 100管/96样 | |
检测方法 | 微量法 | 货号 | GOY-SH111 |
产品分类 | 蛋白含量测定系列 | 用途 | 仅供科研实验 |
测定意义:
样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外,可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。
测定原理:
碱性条件下,蛋白质中肽键,能将 Cu2+还原成 Cu+;2 分子的 BCA与 Cu+结合,生成紫
540-595nm 有吸收峰,562nm 处吸收峰 。
自备仪器和用品:
台式离心机、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、移液器和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
试剂 A:液体 25mL×1 瓶,4℃保存。
试剂 B:液体 0.5mL×1 支,4℃保存。
标准品:液体 2mL×1 支,4℃保存。
工作液配制:临用前请根据拟用工作液体积(样本数×0.2mL),将试剂 A 和 B 按照 50:1 的比例混合,盖紧后充分混匀。
组织样本的前处理:
1. 液体样品:澄清液体样品可以直接测定。
2. 组织样品:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL提取液(自备,根据需要选用者蒸馏水或者生理盐水)冰浴匀浆,10000rpm,4℃离心 10min,取上清,即待测液。
3. 细菌、细胞:按照细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);然后10000rpm,4℃,离心 10min,取上清置于冰上待测。
测定步骤:
1. 可见分光光度计/酶标仪预热 30min,调节波长到 562 nm,蒸馏水调零。
2. 工作液置于 60℃水浴预热 30 min。
注意:空白管和标准管只需要做一次。
计算公式:
Cpr (mg/mL)= C 标准品×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管) =0.5×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)
Cpr (mg/g 鲜重)= C 标准品×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)÷ W =0.5×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空W: 样本质量,g
注意事项:
BCA 法蛋白含量测定试剂盒,适用于测定蛋白浓度在 20-5000μg/ml 样品。测定前取 1-2 个样做预实验,若A 测定管-A 空白管用提取液稀释后再测定,以确保测定的准确性
生化检测试剂盒实验操作说明:
一、抗氧化系列生化检测试剂盒
包括氧化酶(XO)活性分析、超氧阴离子清除能力分析、葡萄糖氧化酶活性(GOD)检测、总抗氧化能力(TAC)检测、植物原花青素(OPC)含量检测、植物类黄酮含量检测、植物总酚(TP)含量检测试剂盒。
氧化酶(XO)活性分析试剂盒为例,提供了一种简单易用的比色分析法,用于测定各种样品中的XO活性,特点是测定血清,血浆,组织/细胞裂解物和其他生物体液中的氧化酶活性,以及广泛的检测范围:15.6 -500 mU/mL。
二、氧化系列生化检测试剂盒
包括过氧化氢酶 (CAT) 活性分析、过氧化氢(H2O2)检测、脂质过氧化(丙二醛) 分析、蛋白质羰基含量检测、超氧阴离子含量检测等试剂盒。
蛋白质羰基含量检测试剂盒(比色法)为例,提供了一种简单易用的比色法,用于分析不同生物样品(细胞/组织裂解液,生物液体)中蛋白质羰基含量。在370 nm处有特征吸收峰。
特点是:1.测定组织样本、细胞、细菌、血清等中的蛋白质羰基含量。2.样本处理、实验步骤以及结果计算更加详尽准确精炼。3.保质期长。
三、抗逆系列生化检测试剂盒
包括超氧化物歧化酶 (SOD) 活力检测、羟自由基清除能力分析、多酚氧化酶(PPO)活性检测、过氧化物酶(POD)活性检测等试剂盒。
超氧化物歧化酶 (SOD) 活力检测试剂盒为例,提供一种简单易用的比色测定法,用于定量测定血清,血浆,组织/细胞裂解液和其它生物体液中的SOD酶活性。
特点是:1.测定血清,血浆,组织/细胞裂解物和其他生物体液中的SOD酶活性。2.通过WST-8法测定SOD活性,zui大抑制率可接近100%,不受一些常见干扰因素的干扰。3.广泛的检测范围:3.13- 200U/mL。
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