实验要点及说明：

1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法；

2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃，并经过铬酸洗液处理；

3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻；

4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率；

5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

产品名称：原代间质细胞培养体系

产品规格：100ml/500ml

货号：BJ-01X1970

保存温度（℃）：2-8℃/-20℃

运输温度（℃）：2-8℃/-20℃

我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，公司产品仅用于科研由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。

培养操作步骤 ：

1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；

2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；

3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；

4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中；

5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内*解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）第二天观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。

猪二肽肽X (DPP10)联免疫吸附测定试剂盒 1-乙-3-（3-二氨）碳二亚盐盐氧化钐 99.99% metals basis对标准溶液 1000μg/ml，溶剂：

猪补体因子I(CFI)联免疫吸附测定试剂盒酚酞单磷环己盐氧化钐 40nm 球形，99.5%水质亚硝盐标样 1.20mg/L，分析标准品

猪叉头框蛋白P3(FOXP3)联免疫吸附测定试剂盒酚酞单磷环己盐氧化铥 99.9% metals basis浓度范围:0.421-3.32(mg/L),分析标准品

猪ras同源物因家族成员a(RHOA)联免疫吸附测定试剂盒苯酰铽粉 99.9% metals basis浓度范围:1.21-3.58(mg/L)，分析标准品

猪核孔蛋白160kda(NUP160)联免疫吸附测定试剂盒苯酰铽 99.99%水质氮氧化物（水剂）标样 分析标准品

猪TATA框结合蛋白相关因子1(TAF1)联免疫吸附测定试剂盒联苯铥片 99.9% (REO)对硝苯标准溶液 1000μg/ml,溶剂：

猪前列腺素内过氧化物合1(PTGS1)联免疫吸附测定试剂盒乙二盐盐氧化镱 99.9% metals basis硝盐氮标准溶液 500mg/L,不确定度2%

猪间隙连接蛋白26(CX26)联免疫吸附测定试剂盒 乙二盐盐硫化锌 4N，靶材水质总有机碳标样 浓度范围:（24.4±1.5）mg/l分析标准品

猪角蛋白17(CK17/KRT17)联免疫吸附测定试剂盒 乙酰硫化锌 99.99% metals basis,3.8-4.2μm,powder中有机磷农药混合标样分析标准品

猪跨膜丝氨蛋白2(TMPRSS2)联免疫吸附测定试剂盒乙酰2-氟-5- 98%中有机磷农药混合标样 分析标准品

猪Pirin蛋白(PIR)联免疫吸附测定试剂盒乙酰乙酰苯七氟丁 蛋白质测序分析,99%五苯酚标准溶液776mg/L,溶剂:

猪抗糖蛋白抗体(GP)联免疫吸附测定试剂盒 N-苯酰-N-苯羟离子对PIC，用于LC-MS，0.5mol/L 水溶液标准溶液1.35-4.29mg/L,水质分析用

猪凝血因子Ⅶ(F7)联免疫吸附测定试剂盒  N-苯酰-N-苯羟七氟丁 离子色谱级标准溶液 500mg/L，溶剂：水

猪末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)联免疫吸附测定试剂盒 4-乙酰苯七氟丁 98%间酚标准溶液 1000μg/ml，溶剂：

猪纤维蛋白肽B(FPB)联免疫吸附测定试剂盒  4-乙酰苯全氟丁磺  97%对硫标准溶液 500μg/ml，溶剂：

猪中性粒激活蛋白3(NAP3)联免疫吸附测定试剂盒碳环己硫铈,四水 AR，98%中对标样 分析标准品
原代间质细胞培养体系高度发散同源异型盒蛋白抗体1,7-双苯-5-羟-6-庚烯-3- Z-Thr-OH

腺病六邻体蛋白抗体1,8-桉叶素 Z-β-Ala-OH

高密度脂蛋白结合蛋白抗体1-羟-3,4,5-三氧山（标准品） Z-Glu-OBzl

转录因子HNF-3α抗体10-姜酚（标准品） Z-Tyr-OH

热休克蛋白β7抗体10-羟癸（标准品) Z-Tyr-OMe

E3连接抑制素受体2抗体10-羟癸烯,10-HDA(标准品) Amoxicillin sodium

透明质及粘蛋白3抗体10-羟喜树(标准品) N-Cbz-D-valine

22号染色体开放阅读框28抗体10-脱乙酰巴卡亭(标准品) Z-Arg(Mtr)-OH·CHA

14号染色体开放阅读框94抗体11(α)氧柴胡皂苷F H-Lys(Z)-OMe hydrochloride