人脑动脉血管平滑肌细胞培养基
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人脑动脉血管平滑肌细胞培养基
人脑动脉血管平滑肌细胞培养基

人脑动脉血管平滑肌细胞培养基

参考价: 面议

具体成交价以合同协议为准
2023-04-26 16:45:06
245
属性:
供货周期:现货;规格:100mL/125mL×4;主要用途:仅供科研实验;产品浓度:1×;
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产品属性
供货周期
现货
规格
100mL/125mL×4
主要用途
仅供科研实验
产品浓度
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上海邦景实业有限公司

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产品简介

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详细介绍

商品详细介绍:

由技术团队精心优化,经过长期测试,本产品可保持人脑动脉血管平滑肌细胞最佳的生长状态。本产品中已包含人脑动脉血管平滑肌细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于人脑动脉血管平滑肌细胞的体外培养。本产品仅供进一步科研使用,不得用于诊断、治疗、临床、家庭及其它用途。

产品说明

产品形态:液体

产品浓度:1×

产品规格:100mL/125mL×4

细菌检测:阴性

真菌检测:阴性

支原体检测:阴性

细胞生长实验:细胞生长良好,形态正常

内毒素含量(EU/mL):≤3

储存条件:2~8℃,避光储存

运输条件:冰袋冷藏运输

有效期:3个月

公司产品仅用于科研

产品属性:

产品名称

规格

产品形态

人脑动脉血管平滑肌细胞培养基

100mL/125mL×4

液体

1.png

实验报告:

一、分离与培养:

二、免疫荧光鉴定:


   1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将成1mm3左右大小;
   2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
   3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织被消化;
   4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
   5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

 

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
   2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
   4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
   5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
   6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

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操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基,90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

 


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