软海绵酸(Okadaic acid,OA)是一种由甲藻类(如鳍藻属和原甲藻属)产生的腹泻性贝类素(DSP toxins),可引起人类急性恶心、呕吐、腹泻和腹痛等症状。腹泻性贝相关的有多种化学素,它们是亲油性的聚醚类或大环内酯类化合物,已经确认DSP的成分有3个组分:第1组酸性素-软海绵酸(OA)及其衍生物鳍藻素(DTX1,DTX2,DTX3);第2组分为中性素-扇贝素(PTXs)组;第3组为其他素-虾夷扇贝素(YTX)及其衍生物45-OHYTX,至今至少有12种成分,其中9种的结构已明确,与腹泻有关的主要是第1组分。FDA制定的高水平为0.2ppm。欧盟建立了软海绵酸(OA)160ug/kg(ng/g或者ppb)的水平。
贝类毒素检测试剂盒基于竞争性ELISA酶联免疫的方法,腹泻性贝类素的抗体包被于酶标孔内,样品与腹泻性贝类素-酶标记物加入到微孔内,若样品中有腹泻性贝类素残留,它将与贝类素-酶标记物共同竞争酶标板包被的抗体。加入TMB底物后,颜色发生变化,经酶标仪检测读数后确定样品中腹泻性贝类素的含量。颜色的深浅与素的残留量成反比。
注意事项
1、标准品中含有腹泻性贝类素,请小心使用。
2、不要使用过期的试剂盒。
3、不同批次的试剂盒不要混用,抗体和微孔板具有盒与批次的特异性。
4、尽量保持室温(25±2.5)°C,避免在通风口操作防止温度过低,过热和/或者蒸发。同样的,不要在阳光直射下实验,防止过热及蒸发。在孵育期间,如果工作台温度过低,应该铺垫若干纸巾或者其他物料。
5、水质量很重要,确保使用蒸馏或者去离子水。
6、加入样品或者试剂到空的微孔板时,吸嘴靠于微孔接近底部,并保持接触。
7、孵育时间的计算越规范越好,保持添加标准品的*性,先添加标准品后添加样品。
8、从低浓度到高浓度地添加标准品,降低影响标准品曲线质量的风险。
9、将微孔板置于放有干燥剂的密封袋中,冷藏保存。