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河豚鱼素(tetradotoxin,简写为TTX)系小分子量非蛋白质神经素,中潜伏期短,死亡率高,素吸收后迅速作用于末梢神经和中枢神经系统,使神经传导产生障碍,先感觉神经麻痹,而后运动神经麻痹,严重者脑干麻痹导致呼吸循环衰竭。河豚鱼的表皮、内脏、血液、睾丸、卵巢、肝、脾、眼球等不同组织中含有河豚鱼素(tetrodotoxin,TTX),它是一种剧的非蛋白神经素。
河豚鱼素化学性质和热性质均很稳定,盐腌或日晒等一般烹调手段均不能将其破坏,只有在高温加热30min以上或在碱性条件下才能被分解。220℃加热20-60min可使素全部被破坏。中潜伏期很短,短至10-30min,长至3-6h发病,发病急,如果抢救不及时,中后较快的10min内死亡,迟4-6h死亡。中后也缺乏有效的解救措施。
河豚鱼素ELISA试剂盒基于竞争性ELISA酶联免疫的方法,河豚鱼素的抗体包被于酶标孔内,样品与河豚鱼素-酶标记物加入到微孔内,若样品中有河豚鱼素残留,它将与河豚鱼素-酶标记物共同竞争酶标板包被的抗体。加入TMB底物后,颜色发生变化,经酶标仪检测读数后确定样品中河豚鱼素的含量。颜色的深浅与素的残留量成反比。
注意事项
1、标准品中含有河豚鱼素,请小心使用。
2、不要使用过期的试剂盒。
3、不同批次的试剂盒不要混用,抗体和微孔板具有盒与批次的特异性。
4、尽量保持室温(25±2.5)°C,避免在通风口操作防止温度过低,过热和/或者蒸发。同样的,不要在阳光直射下实验,防止过热及蒸发。在孵育期间,如果工作台温度过低,应该铺垫若干纸巾或者其他物料。
5、水质量很重要,确保使用蒸馏或者去离子水。
6、加入样品或者试剂到空的微孔板时,吸嘴靠于微孔接近底部,并保持接触。
7、孵育时间的计算越规范越好,保持添加标准品的*性,先添加标准品后添加样品。
8、从低浓度到高浓度地添加标准品,降低影响标准品曲线质量的风险。
9、将微孔板置于放有干燥剂的密封袋中,冷藏保存。