TOP10 Electro
TOP10 Electroporation-Competent Cell
产品规格:

TOP10 电转化感受态细胞基因型：

F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 araΔ139Δ(ara-leu)7697 galU  galK

rpsL (Strr)endA1 nupG

TOP10 电转化感受态简要说明：

TOP10 电击感受态细胞只能用于电击转化，不能用于热激转化。-CMbio-

TOP10 来源于 MC1061 菌株，是目前实验室最常用的感受态细胞之一，基因型与 DH10B 高度类似 (DH10B 为 galE15 型，而 TOP10 为 galU 型)。TOP10 生长速度快 (比 DH5α快，但比 Mach1-T1 生长速度慢)，10 小时可见克隆。recA1 和 endA1 的突变有利于插入 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取。可用于构建克隆，蓝白斑筛选等实验，具有链 霉素抗性。-CMbio-

1. -CMbio-TOP10 电击感受态细胞经特殊工艺制作，pUC19 质粒检测转化效率可达 1×1010 cfu/μg DNA。

TOP10 电转化感受态操作说明：

1. 0.1 cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟，待其沥干水分，正置 5 分钟，使乙 醇充分挥

发，待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖，冰中 静置 5 分钟充分降温。

2. 取-80℃保存的 TOP10 电击感受态细胞插入冰中 5 分钟，待其融化，加入目的 DNA (质粒或连接产物) 并用手 EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。-CMbio-
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒  pUC19；-CMbio-

B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀 DNA 后加入适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重 悬，DNA 浓 度不超过 100 ng/μl，体积不超过 5 μl/50 μl 感受态。-CMbio-
3. 用 200 μl 枪头(用刀切除 0.5cm 枪尖)将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖。

4. 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=1.8 kV (此为 BioRad 电转仪推荐参数，也可按所用 电转仪 推荐的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。-CMbio-
5. 2 分钟后从冰中取出电击杯，放室温，加入 1ml 不含抗生素的无菌 S.O.C. 培养基（室温），用 1ml 枪吹吸电击杯 底部数次混匀后，转移到 50 ml 离心管（BD Falcon 50 ml 锥形离心管等），向离心管中 补加 S.O.C. 培养基至 10 ml。 倾斜 45 度放入摇床，37℃，225 rpm 复苏 60 分钟。-CMbio-
6. 5000 rpm 离心一分钟收菌，重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 S.O.C 平板上（因菌量较大， 若全部涂 板请选用直径 15cm 培养皿 2-5 个）。将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养 13-17 小时。-CMbio

TOP10 电转化感受态注意事项：
1.  加入 DNA 时体积不应大于感受态体积的 1/10。 -CMbio-

2. 电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。-CMbio-

3. 当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。-CMbio-

4. 电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和 DNA 的溶液中产生电流和弧光放电的风险。

5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个 数量级。-CMbio-
6. 对于连接产物转化，转化前乙醇沉淀 DNA 后用适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产 物，保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。 7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时避免用力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。转化高浓

度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。-CMbio-

8. 电击感受态细胞保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。-CMbio-
 TOP10 电转化感受态细胞其他推荐：
DH5α感受态细胞 TOP10感受态细胞 TOP10F′ 感受态细胞 Mach1-T1感受态细胞 T1感受态细胞 JM109感受态细胞 JM110感受态细胞 XL1-Blue感受态细胞XL2-Blue感受态细胞 DB3.1感受态细胞 Stbl2感受态细胞 Stbl3感受态细胞 XL10-Gold感受态细胞 TG1感受态细胞 HB101感受态细胞 SURE感受态细胞 DH10B感受态细胞 DH10Bac感受态细胞 BJ5183感受态细胞BJ5183-AD-1感受态细胞 Stable感受态细胞 Turbo感受态细胞 F-DH5α感受态细胞 F-TOP10感受态细胞 DH5a 电转化感受态细胞 TOP10 电转化感受态细胞 SURE 电转化感受态细胞  BJ5183 电转化感受态细胞 BJ5183-AD-1 电转化感受态细胞 DH10B 电转化感受态细胞 XL1-Blue 电转化感受态细胞 stable 电转化感受态细胞 TG1 电转化感受态细胞EPI400感受态细胞 EPI400 电转化感受态细胞 BL21感受态细胞 BL21(DE3)感受态细胞 BL21(DE3)pLysS感受态细胞 BL21(AI)感受态细胞 BL21 Star(DE3)感受态细胞 BL21-Star(DE3)pLysS感受态细胞 BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受态细胞 Rosetta(DE3)感受态细胞Rosetta-gami(DE3)pLysS Chemically Competent Cell Rosetta-gami B(DE3)感受态细胞Rosetta-gami 2(DE3)感受态细胞 OrigamiB(DE3)感受态细胞 TB1感受态细胞 OverExpress C43(DE3)感受态细胞 Tuner(DE3)感受态细胞 ER2566感受态细胞 F-BL21(DE3)感受态细胞GV3101感受态细胞 EHA105感受态细胞 AGL1感受态细胞 LBA4404感受态细胞 EHA101感受态细胞 GV3101 电转化感受态细胞 EHA105 电转化感受态细胞 AGL1 电转化感受态细胞LBA4404 电转化感受态细胞 EHA101 电转化感受态细胞 Y1HGold感受态细胞 Y2HGold感受态细胞 AH109感受态细胞 Y187感受态细胞 EGY48感受态细胞 NMY51感受态细胞
 

  上海淳麦生物科技有限公司专注于感受态细胞、质粒、载体、农杆菌、酵母等生命科学领域的产品研发和技术服务支持。 
上海淳麦生物科技有限公司在感受态细胞的研发方面，实力雄厚，拥有了克隆、表达、酵母和农杆菌4大类，共计百余种感受态细胞。在电击感受态方面，拥有了大肠杆菌和农杆菌电击感受态种类，极大提高了客户在转基因以及文库构建方面的成功率。