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柱式病毒DNA-RNA双提取试剂盒是在柱式病毒 DNAout 的基础上开发的、专门用于从血清(血浆) 等液体样品及拭子(咽拭子、鼻拭子、口腔拭子、阴道拭子等)中提取微量病毒 DNA 和 RNA 的产品,它具有下列特点:
1. 本产品可用于病毒 RNA、病毒 DNA 提取以及 DNA 和 RNA 双提取。
2. 操作简单,整个过程只需要 20 分钟左右。
3. 灵敏度高,通过 PCR 检测到的终灵敏度可以达到 30-50 拷贝/mL。
4. 安全无毒。
5. 与 PCR 和荧光 PCR 兼容。所得 DNA 可用于 PCR、酶切等实验;RNA 可用于 RT-PCR 和 Northern 杂交等实验。
6. 价廉物美,性价比远高于国外同类产品。
7. 适用于各种材料,包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无 细胞材料。
常温运输及保存,有效期一年。
1. 对于液体病毒样品:在 1.5 mL 离心管中加入 0.1-0.2 mL 液体病毒样品。如果 病毒需要富集,可以将 1.5 mL 液体在 4℃ 24,000 g 冷冻离心 60 分钟,移弃 1.3 mL 后剩下的 0.2 mL 用于第 2 步处理。 对于拭子样品:将一个拭子放入离心管中,加入 1mL 自备的生理盐水,振荡器 上充分振荡半分钟,然后转移 0.2 mL 到 1.5 mL 塑料离心管中,用于第 2 步处 理。
2. 加入 0.6 mL 溶液 A 得到的 0.2 mL 样品中,振荡 30 秒混匀后室温放 置 10 分钟。注意:溶液 A 在 4℃放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在 65℃ 水浴使沉淀*溶解并充分摇匀后再取用。
3. 短暂离心后将 500 uL 溶液转移到离心吸附柱中,室温放置 2 分钟。
4. 12,000 rpm 室温离心 1 分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集 管中。
5. 将剩余溶液短暂离心后全部转移到步骤 3 的离心吸附柱中,室温放置 2 分钟。
6. 12,000 rpm 室温离心 1 分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集 管中。
7. 加入 0.7 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12,000 rmp 室温离心 1 分钟,弃收 集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。
8. 12,000 rpm 室温离心 1 分钟(干甩),弃含穿透液的离心管。
9. 将干甩后的离心吸附柱套入到一个自备的 RNase-free 的 1.5 mL 离心管中,在 离心吸附柱的滤膜的中部加入 30-100 uL 洗脱液,然后室温放置 2 分钟。
10. 12,000 rpm 室温离心 1 分钟,离心管中的溶液即为病毒 DNA 和 RNA 溶液。
11. 所得溶液可以直接用于 PCR、RT-PCR 等实验,也可放-20℃长期保存备用。
柱式病毒DNA-RNA双提取试剂盒