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Dshb 12C5   Dshb产品研究报告  Dshb产品研究报告

目录领域抗原: 多功能蛋白聚糖(透明质酸结合区域)供盈利: YesAntigen 物种: 人类杂交瘤细胞可用(非盈利) : NoIsotype: MIgG1储存者: Asher，R.A。宿主物种: 小鼠抗原序列: 保守序列在 N 端的 g1结构域阳性测试物种反应性: 牛，犬，人，猪，大鼠存款机构: 剑桥大脑修复中心抗原分子量: 明显: > 250kD 保存人注释: 印迹: 是的，但对还原物种敏感反应性: 人类蛋白质图谱: 多功能蛋白聚糖(aka _ GHAP _)基因的免疫原: 透明质酸结合区基因: VCANAlternate 抗体名称: 替代基因名称: WGN; ERVR; GHAP; PG-M; WGN1;CSPG2替代抗原名称: 克隆性: 单克隆骨髓瘤菌株: NS-1表位定位: YesUniprot ID: P13611表位位置或序列: G1 domainEnterz 基因 ID: 1462免疫原序列: 与抗原序列相同。抗体注册表 ID: AB _ 528503其他角色塑造: 推荐用途: ELISA，FFPE，功能阻断，免疫荧光，免疫组织化学，免疫沉淀法，微阵列，蛋白质印迹

所有细胞产品都含有抗菌剂 ProClin。点击这里获取更多信息。这些杂交瘤是你的同事创造的。请确认杂交瘤贡献者和杂交瘤发展研究库(DSHB)在您的出版物的材料和方法。请把电邮给我们。材料和方法部分: 12C5是由 Asher，R.A。(DSHB 杂交瘤产品12C5)储存和处理建议虽然许多细胞产品保持在4摄氏度多年没有活性损失，4摄氏度的货架寿命是高度可变的。对于即时使用，建议短期贮存在摄氏4度长达两周。对于长期储存，将溶液分成不小于20ul 的体积，在 -20 °C 或 -80 °C 冷冻。体积小的试样应能提供足够的试剂供短期使用。应避免冻融循环。对于浓缩物或生物反应器产品，可在冷冻前加入等体积的低温保护剂甘油。最佳的免疫球蛋白浓度因物种和抗体亲和力的不同而不同。对于每种产品，最终用户实验室必须针对每种应用优化抗体效价。使用小鼠免疫球蛋白时，免疫组织化学(IHC)、免疫荧光(IF)和免疫细胞化学(ICC)的良好起始浓度为2-5微克/毫升。对于蛋白质印迹，小鼠 Ig 的推荐浓度范围为0.2 -0.5 ug/ml。一般来说，兔抗体表现出更大的亲和力，并且在初始测试中以较低的免疫球蛋白浓度使用。兔免疫球蛋白的推荐浓度为0.2 -0.5 ug/ml (IF，IHC 和 ICC)和20.50 ng/ml (WB)。

弹性纤维介导的中耳麻醉。藤宫解剖学杂志221.4(2012年10月) : 331.40。肌球蛋白异构体在个体发育中肌纤维肌原纤维间的差异分布。细胞生物学杂志110.3(1990年3月) : 693-701。蛋白多糖核心蛋白在成人视网膜、脉络膜和巩膜中的差异分布。主教 PN 眼科与视觉科学研究53.12(2012年11月7日) : 7528-38。人脑中一种大聚集蛋白多糖的分离。生物化学杂志267.33(1992年11月25日) : 23883-7。在脊髓瘢痕组织急性至慢性成熟期间 NG2，神经聚糖，磷酸三聚糖，短肽聚糖，多功能蛋白聚糖 V2和腱生蛋白 -C 的分布，细胞关联和蛋白质表达水平的变化。神经科学研究杂志71.3(2003年2月1日) : 427-44。Versican 在中枢神经系统损伤中表达上调，是少突胶质细胞系细胞的产物。神经科学杂志: 神经科学学会杂志22.6(2002年3月15日) : 2225-36。Versican 对上皮性卵巢癌细胞及其球体转移的影响。卵巢研究杂志7。(2014) : 70.关于中枢神经系统中软骨样蛋白多糖和连接蛋白的存在。Bignami AGlia 13.4(1995年4月) : 294-308。

人类中耳的弹性纤维介导的生成 Tetsuaki Kawase 1，Shunichi Shibata，Yukio Katori，Aiji Ohtsuka，Gen Murakami，Mineko FujimiyaAffiliations 扩展 PMID: 22803514 PMCID: PMC3458252 DOI: 10.1111/j. 1469-7580.2012.01542。对恒定振动(声振荡)的适应可能在耳小骨的骨-肌腱和骨-韧带界面赋予特定的形态，因此代表了激动人心的研究目标。我们在组织学上检查了(i)鼓膜张肌和镫骨肌的骨附着物，以及(ii)从七具捐赠的老年尸体上取得的砧骨镫骨关节的环状韧带。值得注意的是，醛-品红染色和弹性-马松染色均表明，成纤维的主要纤维成分不是胶原纤维，而是成熟的弹性纤维。弹性纤维染色阳性对照为颞骨材料中的动脉壁弹性层。弹性纤维深入 II 型胶原缺乏的纤维软骨，覆盖耳小骨。肌腱由外层薄的胶原纤维和靠近锤骨或镫骨的内层厚的弹性纤维组成。在特的弹性纤维介导的结构中，透明质酸、多功能蛋白聚糖和纤维连接蛋白沿着弹性纤维强烈表达。透明质酸似乎起到了减少弹性纤维摩擦的润滑剂的作用。聚集蛋白聚糖被强烈标记在富含弹性纤维的韧带内侧的盘状或皱襞状纤维团块中，可能是由于韧带的压缩应力。Tenascin-c 在附件中不明显。在持续振动的环境中，弹性纤维介导的末端似乎能抵抗组织破坏。形态学不太可能是年龄相关性变性的结果。2012年《解剖学杂志》2012年《解剖学会》。

肌球蛋白同种型在个体发育中的肌纤维肌原纤维中的差异分布 G F Gauthier 1Affiliations expandPMID: 2307704 PMCID: PMC2116049 DOI: 10.1083/jcb.110.3.693游离 PMC 文章 AbstractMyosin 使用同种型特异性单克隆抗体原位定位于鸡胸肌中。免疫荧光和免疫金电镜显示肌原纤维的分布。荧光素或罗丹明标记的抗体(12C5)特异性的头部区域(S1)的肌球蛋白被用作一个标记鉴定“胚胎”肌球蛋白。在纵向半薄冰冻切片中，少数肌原纤维强烈染色12C5。同一细胞内其他肌原纤维染色均较弱。类似地，在为 EM 制备的 Lowicryl 包埋的超薄切片中，少数种群优先与金标记的12C5反应。一种针对“新生儿”肌球蛋白棒部分的特异性抗体(5B4)与几乎所有的肌原纤维都有强烈的反应，这在光学和电子显微镜下是明显的。少数与12C5反应强烈的纤维与5B4反应弱。这些观察结果表明，与12C5反应的表位在一些肌原纤维中比在同一细胞内的其他肌原纤维中更丰富。三类肌原纤维可以通过它们在胚胎和新生儿肌球蛋白形式中的相对比例来鉴定: 在几乎所有的原纤维中，新生儿同种型占主导地位; 在少数人群中，胚胎和新生儿同种型都是丰富的; 在少数原纤维中，胚胎同种型占主导地位。结果表明，有不同的肌原纤维群体，其中特定的同种型是分离在一个单独的细胞。

两种快速肌肉肌球蛋白模式的发育转变

采用免疫荧光原位观察发育中的鸡胸肌和背阔肌两块快肌肌球蛋白模式的转变。使用针对胸肌肌球蛋白重链的阶段特异性单克隆抗体定位肌球蛋白同种型。两种抗体(12C5和10H10)识别成人和晚期胚胎肌球蛋白。在10天时，它们对胸肌和后背阔肌的反应较弱，但在18天时反应强烈。两块肌肉对成人特异性抗体(5C3)全不反应，表明18天时用12C5和10H10染色反映了胚胎肌球蛋白。因此，两种不同的胚胎同种型在每块肌肉中依次表达。12C5和10H10在孵化后再次对这些肌肉作出虚弱的反应。在胸肌28天和背阔肌后60天后，对两种抗体的强阳性反应的再现与对成人特异性抗体5C3的反应的次出现良好相关，表明成人模式的开始。在蛋中18天和孵化后60天之间，两块肌肉都对特异于“新生儿”肌球蛋白的抗体(5B4)产生强烈反应。在胸大肌中，大多数纤维中的胚胎在孵化后14天被新生肌球蛋白取代; 到28天，成人和新生肌球蛋白在大多数纤维中都表达; 在成人中，新生肌球蛋白全被成人同种型取代。相比之下，背阔肌后部的许多纤维在孵化后至少60天仍然表达胚胎和新生儿肌球蛋白，其余的纤维表达新生儿同种型; 新生儿同种型存在于一些纤维中，甚至在成年背阔肌后部。因此，我们在两种不同的快速肌肉中原位展示了四种不同的重链同种型。“早期胚胎”、“晚期胚胎”、“新生儿”以及最终的“成年”异构体在每块肌肉中都有表达，并且不止一种异构体常常共存于同一纤维中。

蛋白多糖核心蛋白在成人视网膜、脉络膜和巩膜中的差异分布

摘要目的: 研究蛋白多糖(PG)核心蛋白在成人视网膜、脉络膜和巩膜中的存在和分布。方法: 将尸体眼组织解剖成 Bruch 膜/脉络膜复合体，分离 Bruch 膜或神经感觉视网膜。用阴离子交换色谱法提取 PGs，并进行部分纯化。通过串联质谱法和通过数据库搜索鉴定的 PG 核心蛋白分析蛋白酶化肽。在人类黄斑组织切片上用免疫荧光显微镜检查前列腺素的分布情况。结果: 在人类视网膜中发现了基底膜聚糖 perlecan，agrin 和胶原 -XVIII，并且存在于内界膜，血管壁和 Bruch’s 膜中。透明质酸多糖和聚集蛋白聚糖也被检测到。在 Bruch 膜中发现了 Versican，而聚集蛋白聚糖分布在整个视网膜、脉络膜和巩膜。软骨连接蛋白 HAPLN1在感光间质和巩膜中含量丰富，而 HAPLN4(脑连接蛋白2)则遍布视网膜和脉络膜。小富氨酸重复 PG (SLRP)家族成员双糖链蛋白聚糖、核心蛋白聚糖、纤维调节蛋白、卢米肯、米美肯、黄醇和普罗拉金存在，在视网膜、脉络膜和巩膜中有不同的分布模式。结论: 蛋白质组学和免疫组织化学分析方法的结合次全面分析了 PG 核心蛋白在人类视网膜、脉络膜和巩膜中的存在和分布。这补充了我们对人眼中糖胺聚糖链分布的认识，对于理解眼睛在健康和疾病中的结构和功能调节具有重要意义。

人脑中一种大聚集蛋白多糖的分离

摘要从人脑中分离出一个大的蛋白多糖(365kDa) ，经过抗软骨素单克隆抗体鉴定。分离需要阴离子交换层析，然后通过 Sephacryl S-500柱进行凝胶过滤。蛋白多糖与[3H ]透明质酸(HA)特异性结合。高盐浓度(高达4M)不会降低结合力，而在低 pH (< 4.0)时则会抑制结合力。HA 的八聚体和十聚体(而不是六聚体)低聚糖抑制了结合。蛋白多糖的有限蛋白水解产生了一个相对稳定的多肽(80kDa)。该80-kDa 多肽的氨基末端序列与人成纤维细胞蛋白多糖 versican 的 cDNA 衍生的氨基末端序列相同。一个针对牛蛋白多糖的单克隆抗体通过免疫印迹技术与从人脑中分离出的蛋白多糖进行反应，从而识别出多功能核心蛋白。用该抗体对牛脊髓丙酮固定冷冻切片中的蛋白多糖进行定位。蛋白多糖在中枢神经系统的定位与先前报道的胶质透明质酸结合蛋白(GHAP)相同，后者是脑细胞外间质(ECM)的一种60千达糖蛋白。然而，在两种抗原对透明质酸酶的敏感性方面观察到一个主要的差异。如先前报道的，GHAP 通过透明质酸酶消化从组织中释放，而蛋白多糖在这些条件下持续存在。我们得出结论，脑 ECM 中的蛋白质-透明质酸聚集体含有 GHAP 和多功能蛋白聚糖，GHAP 仅通过与透明质酸的相互作用保留在 ECM 中，并且蛋白多糖以其他方式锚定，并且可能连接细胞表面与 ECM，因为它不是通过透明质酸酶消化释放的。

在脊髓瘢痕组织急性至慢性成熟期间 NG2，神经聚糖，磷酸三聚糖，短肽聚糖，多功能蛋白聚糖 V2和腱生蛋白 -C 的分布，细胞关联和蛋白质表达水平的变化

先前的研究已经将嵴髓损伤后轴突再生的失败与轴突接触富含软骨素蛋白聚糖的瘢痕组织联系起来(CSPGs; Davies 等，1999)。在本研究中，我们在损伤后24小时至6个月的时间点对成年大鼠脊髓刺伤内的5个轴突生长抑制性 CSPG 和腱生蛋白 -C 进行了免疫组织化学和定量 Western 印迹分析。定量蛋白质印迹分析显示，24小时后神经多糖、腱生蛋白 C 和 NG2水平强劲增加，提示这些分子在防止急性形成瘢痕组织的轴突再生中发挥作用。在8天时达到245/130kD 神经多糖，NG2和250/200kD 腱生成素 -C 的峰值水平，在损伤后1个月达到磷酸三酯和140/80kD 短肽的最大水平。然而，Versican V2蛋白水平显示出相反的趋势，在所研究的所有时间点都低于未损伤的脊髓值。损伤后8天的共聚焦显微镜显示磷酸盐、 NG2和腱生蛋白 -C 的免疫反应性增强，特别是在损伤中心的纤连蛋白(+)瘢痕组织内。相比之下，星状 NG2(+)细胞突起的病灶边缘显示神经元，星形胶质细胞的病灶边缘显示神经元的程度要小得多。在损伤后6个月，慢性瘢痕组织中130kD 的神经多糖、短肽和 NG2水平仍显著高于对照组。我们的研究结果显示了抑制性 CSPGs 和腱生蛋白 C 的新的表达模式和细胞关联，这对急性和慢性脊髓瘢痕组织的轴突再生具有重要意义。版权所有2002年 Wiley-Liss 公司。

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