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包装规格:48T/96T
有效期:6个月
预期应用:ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中相关物质含量。
1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3.中、英文说明书可能会有不*之处,请以英文说明书为准。
4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
牛ELISA试剂盒样本处理及要求:
1. Serum:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
【犬肾素(Renin)ELISA试剂盒品牌推荐-elisa试剂盒组成】
序号 | 名称 | 规格(96T×1) | 规格(96T×2) |
1. | 酶标板 | 96T×1 | 96T×2 |
2. | 酶标记物 (红盖) | 11ml×1 | 11ml×2 |
3. | 抗体工作液 (蓝盖) | 5.5ml×1 | 11ml×1 |
4. | 20X浓缩洗涤液 | 40ml×1 | 40ml×1 |
5. | 底物液A (白盖) | 6ml×1 | 11ml×1 |
6. | 底物液B (黑盖) | 6ml×1 | 11ml×1 |
7. | 终止液 (黄盖) | 6ml×1 | 11ml×1 |
8. | 阳性对照 (红盖) | 1.0 ml×1 | 1.5 ml×1 |
9. | 阴性对照 (绿盖) | 1.0 ml×1 | 1.5 ml×1 |
10. | 盖板膜 | 1张 | 2张 |
11. | 自封袋 | 1个 | 1个 |
12. | 说明书 | 1份 | 1份 |
【储存及有效期】 储存于阴凉干燥处(2-8℃),有效期期12个月。
包被板开封后请于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限为2个月。
【适用仪器】 含450nm、630nm波长的酶标仪,37℃恒温设备,可调微量移液器。
【样品准备】
1.取动物全血按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品1周内可于2~8℃保存,长期需置-20℃保存。
2.用样品稀释液将待检血清按40倍稀释(如5μl血清加入195μl样品稀释液中,混匀)。阴、阳性对照不用稀释。
3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释。
ELISA试剂盒测定步骤:
固相包被→加待测样品→温育→洗刷+加酶标物→温育→洗刷→加底物→温育一加停止液→比色→判定成果。
ELISA试剂盒操作较繁杂,在操作中应留意以下5个方面。
1. 跟着病情的进展或由其他因素影响,某些抗体在机体内的含量发作大幅动摇,因此有必要对标本进行预处理。间接法测定中,标本恰当稀释还可下降非特异性反响。
2. 加样一般运用加液器,在ELISA试剂盒中一般有4次加样:加标本、加酶结合物、加底物和加停止液。加标本时有必要每份标本运用一支移液器吸嘴,以免交叉污染。加酶结合物、底物和停止液时则不需更换吸嘴。
3. 在成批手艺检测中,还应留意操作时差的影响。加样及混匀时刻的差异,使抗原抗体反响和酶促反响时刻不*,对竞争法及定量检测影响很大,不留意可能会导致错误成果或定量不准。
4. 洗刷是ELISA试剂盒操作过程中决定试验胜败的一个关键步骤。意图是除去未结合的免疫反响物,停止抗原抗体反响,除去标本中与反响无关的成分、游离的酶标物以及反响过程中吸附于固相载体上的非特异性物质。可用洗板机洗板或手艺洗板,前者洗刷质量较好,各反响孔洗刷作用均一,批内、批间差异小,手艺洗板应留意操控各孔洗刷作用,差异不宜太大。
5. 精确判定成果须运用ELISA试剂盒测读仪,比色法判读可选择单波长或双波长,依据反响液色彩的不同选用不同波长的滤光片,以空白孔校零测定反响孔的吸光度值。酶标仪具有杰出的重复性。
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