ELISPOT酶联免疫斑点技术使用

淋巴细胞受到抗原刺激后局部产生细胞因子，此细胞因子被ELISPOT板底PVDF膜上(预包被的)的特异性单抗捕获。去除细胞后，被捕获的细胞因子与Biotin标记的单抗结合，其后再与碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶标记的亲和素结合。加底物显色后，PVDF膜上出现紫色或红褐色的斑点表明细胞产生了细胞因子，通过酶联免疫斑点分析仪（ELISPOT Reader）对斑点的进行自动计数和分析。

德国biosys由化学家兼工程师Werner Freber创建于1986年，专注于 EliSpot酶联免疫斑点计数和定量自动化检测分析设备30多年，biosys公司的立体3D双光照明（增强斑点与背景的对比度，有效抑制板孔侧壁反光造成的“幻影现象”，提高检测度），能进行单斑点、每孔光密度测定以定量细胞因子分泌的照明系统，解决了ELISPOT斑点计数的快速化，标准化和斑点信息的详细化，并且可以对细胞因子进行定量分析，是能进行单斑点、每孔光密度测定以定量细胞因子分泌的照明系统，获得应用于ELISPOT斑点识别的3D双光源技术，实现对ELISPOT膜板和ELISPOT透明板的良好识别，个采用改进机械结构的前置式载物台和自动开关密闭检测室，同一孔中同时识别多至12色ELISPOT斑点，实现荧光ELISPOT检测，欧盟科技项目,产品成熟，30年历史，1000多家实验室使用，国内近百家单位使用，已成为荧光/Elispot酶联免疫斑点检测分析的金标准。

世联博研北京科技有限公司是德国BIO-SYS包含bioreader酶联免疫斑点分析仪和biocount病毒菌落计数仪在内全系列产品在中国大陆、香港、澳门、中国台湾区域总授权代理商，为广大科研用户提供BIO-SYS全系列产品提供售前、售中和售后服务

Biosys酶联免疫斑点图像计数和分析产品特点：

●立体3D双光照明系统：

增强斑点与背景的对比度，有效抑制板孔侧壁反光造成的“幻影现象”，提高检测度。能进行单斑点、每孔光密度测定以定量细胞因子分泌的照明系统。
● 彩色成像及分析系统：

高分辨率2340×2000 分辨率SONY fire wire真彩数码成像系统，可进行双色或三色Elispot实验结果的检测。也适用于病毒斑(Viral Plaque)、克隆形成(CFU)、肿瘤细胞集落形成（HTCFA）,干细胞集落形成试验等。  数据量高达5M 的图像数据（单孔）﹑双色以上的图像分析功能, 一体化HP 20’ 液晶显示器.
● 高精度X－Y定位载板台：

采用高精度齿轮步进电机，避免了皮带轮步进电机的打滑和老化，定位精度<0.01mm。

高精度微步进电机、齿轮传动方式、样品架移动精度< 0.01mm
● 通用性强：

适用各种载玻片、35-100mm培养碟、6 / 12 / 24 / 48 / 96/384孔各型培养板。对于实验室常用的U-Cytech、MILLIPORE、NUNC、 Whatman、Greiner等公司的透明培养板、不透明（白色）培养板、以及PVDF膜培养板均适用。
● 自动聚焦：

需进行不同类型培养板的检测时，无须手动调焦，转换更为方便。
●高灵敏性，高特异性的优点：

动态“像素周围识别”，模糊、弥散、过大、过小斑点以及高背景或不规则背景均可检测。
●高分辨率：

每孔可检测多至2000个斑点，直径>3m 的斑点即可被有效检测（通常设定检测的斑点大小为20-50m）。
●边沿识别系统：

尤其针对透明板、白色PVDF板，可有效识别板孔边缘，保证整个板孔的计数。
●光密度值测定：

应用ELISA透光测量原理，可对每个斑点，每个孔进行光密度值测定，定量分析细胞因子分泌。
●*的WASHOUT背景补偿功能：

对于背景重的培养板孔可进行自动背景补偿调节。
●测量结果可信：

已经过MABTECH, U-Cytech, Diaclone, Pharmingen, R&D等公司ELISPOT产品的验证，测量结果可信度高。
●用户自定义参数和再分析：

用户可根据试验情况设置斑点识别参数，直接重新分析已扫描数据，不必重复扫描。相同参数下分析结果可重复性为+/-*。
●“One－Click”测量区域选择：

直观的板孔选择界面，可轻松进行单孔、任意孔区域、全板扫描。
●智控分析方式：

用户可手动选择需去除的斑点，自定义需去除的破损区域或无法识别区域，测量结果更可信。
●数据分析全面：

包括培养孔原始数据如每孔斑点数、斑点几何形状（直径、圆度、曲率、毛糙度）参数、每个斑点坐标、光密度（提示细胞因子量）等以及样本均数、方差、统计学分布等多种统计数据和分析图表。
●直接输出模式：

可将整板图像，单孔图像，每孔斑点数，斑点详细数据、分布、和统计学分析结果直接输出到Word、Excel、Powerpoint。可选择HTML,BMP, JPEG, PDF等多种格式。
●检测快速：超高精度扫描每个培养板约需12-15分钟；快速扫描每个培养板约需6-8分钟 。
● 欧盟CE认证、符合21 CFR PART 11认证要求

●历史悠久，产品成熟度高、文献量大：

30多年历史验证，1500多个实验室成功使用，国内有50多的单位成功使用，无技术和应用风险。

应用范围：

单细胞解析度/体外抗原特异性T细胞频率的准确测量，细胞因子协同表达/双色ELISPOT，肿瘤免疫，T细胞功能研究，移植免疫等；对探索免疫系统疾病的发病机制和肿瘤免疫细胞治疗评价具有重要意义。

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