细胞名称：人结直肠癌细胞氟尿嘧啶耐药株（STR鉴定）

细胞代码： LOVO/5FU

培养条件： F12K+10%FBS+1%P/S

生长状态：贴壁生长

人结直肠癌细胞氟尿嘧啶耐药株（STR鉴定）

人肝窦内皮细胞永生化

人肠癌细胞永生化

人颈静脉球瘤细胞永生化

人副神经节瘤细胞永生化

人肠息肉上皮细胞永生化

人原代听神经瘤细胞永生化

人原代髓核细胞永生化

人原代神经鞘膜瘤细胞永生化

人胰腺肿瘤成纤维细胞永生化

人眼睑皮脂腺癌细胞永生化

人主动脉瓣膜间质细胞永生化

人睾丸支持细胞永生化

人骨骼肌细胞永生化

人卵巢癌细胞永生化

人真皮成纤维细胞永生化

人原代甲状旁腺主细胞永生化

人原代乳腺上皮细胞永生化

人原代乳腺癌成纤维细胞永生化

人原代软骨细胞永生化

人脐静脉内皮原代细胞+GFP 原代细胞+GFP

人神经母细胞瘤细胞 sh-sy5y转染突变型

人神经母细胞瘤细胞 sh-sy5y转染野生型

小鼠肺成纤维细胞永生化

小鼠附睾脂肪干细胞永生化

小鼠肾小球系膜细胞永生化

小鼠胰腺星状细胞永生化

小鼠脂肪干细胞永生化

麝香鼠原代乳腺上皮细胞永生化

小鼠骨髓巨噬细胞永生化

小鼠角膜上皮细胞永生化

小鼠肝星状细胞永生化

大鼠脑微血管内皮细胞永生化

大鼠内皮祖细胞永生化

大鼠脂肪干细胞+RFP 原代细胞+RFP

鸡胚成纤维细胞永生化

鸡气管黏膜上皮细胞永生化

鸭脑微血管内皮细胞永生化

鸭胚成纤维细胞永生化 Duck embryo

鸭胚肝间质细胞永生化

羊睾丸间质细胞永生化

湖羊瘤胃上皮细胞永生化

山羊乳腺上皮细胞永生化

猪脂肪干细胞永生化

猪扁桃体上皮细胞永生化

猪肝星状细胞永生化

猪骨骼肌卫星细胞永生化

猪子宫内膜上皮细胞永生化

猪鼻腔粘膜上皮细胞永生化

猪外周血单个核细胞（PBMC）永生化

猪主动脉内皮细胞永生化

猪小肠上皮细胞永生化

雪貂鼻腔粘膜上皮细胞永生化

兔子宫内膜上皮细胞永生化

兔肝脏间质细胞永生化

37.如何从T25瓶中转移sf9细胞？能用蛋白酶消化吗？

我们推荐使用脱落细胞的方法，此技术破坏性最小，生活力最高。通过使用巴斯德吸液管，让细胞上培养基流动。作为一种选择你也可以轻轻拍打培养瓶。只有在绝对必要的情况下，才使用胰消化细胞。

38.胰消化一个T25瓶的sf9细胞：

1. 去除培养基。

2. 用2ml 1xPBS（足以覆盖细胞表面）洗涤细胞，去除PBS。

3. 加入2ml 1x胰EDTA（恰好覆盖细胞表面）。

4. 37 ℃孵育5到10分钟。在仪器下检测看到5分钟后它们正在向上移动。

5. 向细胞中加入2ml 细胞培养液，移入锥形管，用2ml培养液洗瓶壁，移入同一锥形管中。（培养基中的FBS终止了胰的活性。）

6. 离心（1100rpm）沉淀细胞。去除培养基。

7. 用新的培养基重新悬浮细胞。传代。

39.在Sf9, Sf21, 和high Five细胞悬浮培养时，肝素的使用量是多少？

为了防止悬浮培养细胞聚集的形成，使用肝素浓度为10单位/毫升细胞悬液。

40.在重新冻存sf9细胞前，它可以传多少代？随着传代的次数的增加，它的感染能力会降低吗？

通常情况当细胞经过30次传代后，应该返回冻存。无论什么时候计数时，都应该检查细胞活力。如果超过95％的细胞保持有活力和在大约30小时左右加倍，细胞仍然可以使用。如果活力和加倍时间下降，它们的感染力将不在是有效的。

41.贮存在冰箱中的瓶口已开的培养基，在放置几天后颜色变紫?

这主要是由于在暴露到周围的CO2水平时，碳酸氢纳导致了pH值的上升。您可以在使用前松开瓶口，在CO2培养箱孵育培养基10-15分钟，来校正溶液的pH值（确定松开瓶口以保证气体交换）。

42. 细胞培养基偶然被冻，可否继续使用？

如果细胞培养基偶然被冻，您应该熔化培养基并观察是否有沉淀产生。如果没有沉淀产生，培养基可以正常使用，如果出现沉淀，只能丢弃这些培养基。

43. 无血清培养与有血清培养使用的抗生素量一样吗？

当在无血清培养基中添加抗生素时，降低至少在有血清培养基中所使用浓度的50%。血清蛋白会结合和灭活一些抗生素。在无血清培养条件下，抗生素不被灭活，可能对于细胞达到毒性水平。

44. 培养基中添加了血清和抗生素后，可长期保存吗？

一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时，您应该在两到三周内使用它。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。

45.培养基及其它添加物和试剂可反复冻融吗？

大部分添加物和试剂最多可以冻融3次，如果次数更多都会在包含蛋白的溶液引起一定水平的降解和沉淀，将会影响它的性能。