蛋白纯化仪校准

蛋白纯化仪校准，为了保证分析结果的准确，有必要对蛋白质纯化分析仪的性能进行校准和质量控制。由于是蛋白质纯化分析是近年来兴起的新新领域，目前国内外还有没针对蛋白质纯化分析仪仪器的相关标准，只有针对于药物生产中对仪器自带分析软件的相关标准要求（如 FDA 的 21-CFR-part11）。国内也尚未出台有关蛋白质纯化分析仪的检定规程或校准规范。随着蛋白质纯化分析仪的需求和数量随着生物制药的兴起成指数级增长，对于仪器性能的要求也越来越高，如何确保其结果的准确性和溯源性，从而确保产品质量的问题日益凸显。因此，对蛋白质纯化仪校准特性指标及其校准方法进行研究，并整理形成相关技术规范，对仪器性能进行校准和质量控制是十分必要和急迫的；

蛋白质纯化分析仪主要的纯化和分离原理包括凝胶过滤层析、离子交换层析、疏水层析、反相层析和亲和层析。分析仪的工作流程主要包括待测样品通过进样系统，由输液系统进入分析仪的分离系统，根据样品中各组分在层析柱内固定相和流动相间分配或吸附等特性的差异，达到分离效果，由检测器检测各组分的保留时间和响应值（峰面积或峰高）后由样品收集系统收集目标蛋白质。分析仪除了传统的紫外检测器外通常还配有 pH 检测器、电导检测器等多种检测器实时控制流路中各项理化参数，以确保蛋白质分离的效果。

分析仪主要由进样系统、输液系统、检测系统、分离系统、收集系统和数据处理系统组成。

蛋白纯化仪校准计量特性确认为：

泵流量示值误差、泵流量稳定性、泵梯度流量准确度、pH检测示值误差、pH 检测重复性、电导检测示值误差、电导检测重复性、电导检测温度示值误差、紫外检测器波长示值误差、紫外检测器波长重复性、收集器温度示值误差、收集器加样示值误差、收集器加样重复性、整机定量重复性和整机定性重复性。

紫外检测器波长示值误差和重复性（蛋白纯化仪校准）

将检测器和数据处理系统连接好，通电预热稳定后，用注射器将纯水注入检测池内进行冲洗后，充满检测池。待仪器稳定后，从检测器入口注入紫外分光光度计用溶液标准物质（空白），待检测器示数稳定后，在（200~350）nm 波长下选择三个用户常用的检测点，将检测器示数回零。然后，从检测器入口注入紫外波长标准物质，待示值稳定后，调节检测器波长进行测量。例如测试235nm 时，从 230nm 开始到 240nm，每 0.5 分钟改变 1nm，记录每个波长下的吸收值。有波长扫描功能的仪器可画出紫外分光光度计用溶液标准物质光谱曲线。测得的最大或最小吸收值对应的波长即为特征波长实际测量值，重复测量3 次，3 次测量值的平均值与参考波长之差为波长示值误差，3 次测量值中的最大值与最小值之差为波长重复性。按此方法依次测试各测试的波长示值误差和重复性。

校准用的标准物质

1 pH 标准物质：pH 测量范围（3～10），不确定度应小于等于 0.01（k=2）

2 电导率标准物质：相对不确定度应小于或等于 0.25%（k=2）。

3 紫外分光光度计溶液标准物质：参考波长为 235nm，257nm，313nm 和350nm。

公司背景介绍：

泽恒.华谱在计量校准、验证与确认的优势是专注做生物制药质控服务，针对一些特殊的仪器都非常熟悉，核心团队来源于制药公司和仪器厂家，对仪器和GMP法规都很熟悉，比如：我们团队专门研发了替代进口的荧光定量PCR仪校准装置，大大降低荧光定量/定性PCR仪校准的成本（远低于同行）；我们开发了细胞计数仪的校准内部规程；开发了细胞复苏仪的内部校准规程；开发了凝胶电泳扫描仪的校准规程；我们开发了温度验证所需要的超低温和超高温一体化无线探头，降低用户大量使用探头时的成本，代替了进口；这些例子还有很多，因为我们都是生物出身，所以我们关注每一个生物用户工艺要求，在生物制药仪器设备上面专注，“与质量同行、做仪器设备质控”，为了让生物制药更安全而努力。

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泽恒.华谱是专注于为生物制药行业提供实验室仪器计量校准、仪器设备验证与验证/厂房验证的专业服务商。我们给制药客户解决的是一站式QC/QA/工程部/验证部/生产部的质控外包服务。