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测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样AFP elisa试剂盒血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2 小时或4oC 过夜,然后1000×g 离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20oC 或-80oC 保存,但应避免反复冻融。
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
产品名称 | CVNPF elisa试剂盒 |
英文名称 | Human Cobra venom neuronal protective factor, CVNPF Elisa Kit |
规格 | 48T/96T |
试剂和样本的控制方法:
一、试剂
1.试剂的选择:国家明确要求要采用批批检定的形式对ELISA试剂严格把关,我司严格按照国家标准进行,已获得国家承认的“三证”,每一个产品都有对应的批号,只要客户提前下单,我们就能为您提供新批次的产品,不必担心会有过期的试剂。我司的试剂,值得您选择。
2.试剂的准备:先将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20-30 min后,再进行测定,使试剂盒在使用前与室温平衡,这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度,以满足后面的测定需求。
二、样本
1.内源性干扰因素:包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等;
类风湿因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②标本用联有热变性IgG的固相吸附剂处理;
③检测抗原时,可用加入到标本稀释液中使RF降解;
补体的控制方法:
①用EDTA稀释标本;
②56℃ 30 min加热血清使C1q灭活;
2.外源性干扰因素:包括标本溶血、细菌污染、保存时间过长或凝固不全等;
控制方法:采血时规范操作,采集的血液勿用力震荡,以防溶血;收集标本时采用无菌试管,经检测后再低温冻存;保存时间不宜过久,检测时尽量采用新鲜标本;对于凝固不全的血标本可适当加入抗凝剂,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再离心分离血清。
操作步骤:
1)使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2)根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3)加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5)每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8)取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9)在450nm波长处测定各孔的OD值。
具有如下优点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、性价比非常好,节省实验经费。
肠产毒性E.coli核检测试盒 规格:HPLC≥98%;20mgTamsulosin Hydrochloride
肠道病毒EV70 PCR检测试盒 规格:HPLC≥98%;20mgTamoxifen Citrate
肠道病毒EV71 PCR检测试盒 规格:HPLC≥98%;20mgTalbutal CIII DISCONTINUED
肠道病毒EV71/柯萨奇病毒A16型2联PCR检测试盒 规格:HPLC≥98%;20mgTagatose
肠道病毒PCR检测试盒 规格:HPLC≥98%;20mgTacrolimus
肠道病毒通用型/EV71/柯萨奇病毒A16型3联PCR检测试盒 规格:HPLC≥98%;20mgTacrine Hydrochloride
肠道腺病毒40型PCR检测试盒 规格:HPLC≥98%;20mgSuprofen
肠道腺病毒41型PCR检测试盒 规格:HPLC≥98%;20mgSumatriptan Succinate
肠侵袭性E.coli核检测试盒 规格:HPLC≥98%;20mgSumatriptan
肠致病性E.coli核检测试盒 规格:HPLC≥98%;20mgSulisobenzone
超级细菌PCR检测试盒 规格:HPLC≥98%;20mgSulindac Related Compound A
出血性大肠杆菌PCR检测试盒 规格:HPLC≥90%;10mgSulindac
传染性法氏囊病病毒PCR检测试盒 规格:HPLC≥98%;10mgSulfisoxazole Acetyl
传染性非典型肺炎病毒PCR检测试盒 规格:HPLC≥98%;10mgSulfisoxazole
传染性脓疱病毒PCR检测试盒 规格:HPLC≥98%;20mgSulfinpyrazone
CVNPF elisa试剂盒48T/96TELISA Kit for Calpain 12 (CAPN12)假单胞P琼脂
48T/96TELISA Kit for Fruitless (FRU)假单胞F琼脂
48T/96TELISA Kit for Heterotaxy 1 (HTX1)卫矛半固体琼脂
48T/96TELISA Kit for Xylulokinase Homolog (XYLB)琼脂
对照品人单核细胞增多性李斯特素(listeriolysin)ELISA Kit,48T/96T25mg
对照品猪单核细胞增多性李斯特素(listeriolysin)ELISA Kit,48T/96T200mg
对照品牛胆(Cholic acid)ELISA Kit,48T/96T 50mg
对照品人胆(Cholic acid)ELISA Kit,48T/96T 500mg
对照品人低分子肝素(LMWH)ELISA Kit,48T/96T 200mg
对照品猪低分子肝素(LMWH)ELISA Kit,48T/96T 30mg×4amplues