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测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.凋亡相关因子elisa试剂盒加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
试剂和样本的控制方法:
一、试剂
1.试剂的选择:国家明确要求要采用批批检定的形式对ELISA试剂严格把关,我司严格按照进行,已获得国家承认的“三证”,每一个产品都有对应的批号,只要客户提前下单,我们就能为您提供新批次的产品,不必担心会有过期的试剂。我司的试剂,值得您选择。
2.试剂的准备:先将试剂盒先从冰箱中拿出来,在室温下放置20-30 min后,再进行测定,使试剂盒在使用前与室温平衡,这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度,以满足后面的测定需求。
二、样本
1.内源性干扰因素:包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等;
类风湿因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②标本用联有热变性IgG的固相吸附剂处理;
③检测抗原时,可用加入到标本稀释液中使RF降解;
补体的控制方法:
①用EDTA稀释标本;
②56℃ 30 min加热血清使C1q灭活;
2.外源性干扰因素:包括标本溶血、细菌污染、保存时间过长或凝固不全等;
控制方法:采血时规范操作,采集的血液勿用力震荡,以防溶血;收集标本时采用无菌试管,经检测后再低温冻存;保存时间不宜过久,检测时尽量采用新鲜标本;对于凝固不全的血标本可适当加入抗凝剂,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再离心分离血清。
操作步骤:
1)使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2)根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3)加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5)每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8)取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9)在450nm波长处测定各孔的OD值。
具有如下优点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、性价比非常好,节省实验经费。
anti- AlaRS antibody大鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA试剂盒
anti- ALAS2 antibody大鼠巨噬细胞炎症蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA试剂盒
anti- Albumin antibody大鼠巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA试剂盒
anti- Albumin antibody大鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA试剂盒
anti- ALCAM antibody大鼠淋巴细胞趋化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA试剂盒
anti- Aldehyde oxidase antibody大鼠淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISA试剂盒
anti- ALDH1A1 antibody大鼠淋巴细胞因子ELISA试剂盒
anti- ALDH1A1 antibody大鼠促黄体激素(LH)ELISA试剂盒
anti- ALDH1A1 antibody大鼠黄体生成素释放激素(LHRH)ELISA试剂盒
anti- ALDH1A2 antibody大鼠L选择素(L-Selectin/CD62L)ELISA试剂盒
anti- ALDH1A3 antibody大鼠L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA试剂盒
anti- ALDH1B1 antibody大鼠低密度脂蛋白(LDL)ELISA试剂盒
anti- ALDH1B1 antibody大鼠L-鼠乳酸脱氢酶(L-LDH) ELISA试剂盒
anti- ALDH1L1 antibody大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒
anti- ALDH1L2 antibody大鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒
凋亡相关因子elisa试剂盒大鼠血管生成素-2(rat Angiopoietin-2)Human HSD3B1(3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase/Delta 5-->4-isomerase type 1) ELISA Kit
Human IFIH1(Interferon-induced helicase C domain-containing protein 1) ELISA Kit
大鼠心钠素(rat ANP)Human KIRREL(Kin of IRRE-like protein 1) ELISA Kit
Human LYPD3(Ly6/PLAUR domain-containing protein 3) ELISA Kit
大鼠载脂蛋白E(rat APO E)Human MAP1LC3A(Microtubule-associated proteins 1A/1B light chain 3A) ELISA Kit
Human MAP1LC3B(Microtubule-associated proteins 1A/1B light chain 3B) ELISA Kit
大鼠肝再生增强因子(rat ALR)Human TAB3(TGF-beta-activated kinase 1 and MAP3K7-binding protein 3) ELISA Kit
Human TAB2(TGF-beta-activated kinase 1 and MAP3K7-binding protein 2) ELISA Kit
大鼠细胞磷酸腺苷脱氨酶(rat AMPD)Human TAB1(TGF-beta-activated kinase 1 and MAP3K7-binding protein 1) ELISA Kit
Human KAT8(Histone acetyltransferase KAT8) ELISA Kit
大鼠淀粉酶(rat Amylase)Human CTSC(Dipeptidyl peptidase 1) ELISA Kit
Human WNT4(Protein Wnt-4) ELISA Kit
大鼠血管生成素-1(rat Angiopoietin-1)Human WNT2B(Protein Wnt-2b) ELISA Kit
Human WNT2(Protein Wnt-2) ELISA Kit
大鼠血管紧张素I(rat Angiotensin-1)Human WWC1(Protein KIBRA) ELISA Kit
Human WIF1(Wnt inhibitory factor 1) ELISA Kit
大鼠血管紧张素II受体(rat Angiotensin-2R)Human UACA(Uveal autoantigen with coiled-coil domains and ankyrin repeats) ELISA Kit
Human NUDT1(7,8-dihydro-8-oxoguanine triphosphatase) ELISA Kit
大鼠晚期氧化蛋白产物(rat AOPP)Human PDLIM1(PDZ and LIM domain protein 1) ELISA Kit
Human PEG10(Retrotransposon-derived protein PEG10) ELISA Kit
大鼠Apelin(rat Apelin)Human PREX1(Phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate-dependent Rac exchanger 1 protein) ELISA Kit
Human PRKCSH(Glucosidase 2 subunit beta) ELISA Kit
大鼠酸敏感离子通道3型(rat Asic3)Human RAP1A(Ras-related protein Rap-1A) ELISA Kit
Human CRCP(DNA-directed RNA polymerase III subunit RPC9) ELISA Kit
大鼠骨涎蛋白(rat BSP)Human RECK(Reversion-inducing cysteine-rich protein with Kazal motifs) ELISA Kit
Human ROBO4(Roundabout homolog 4) ELISA Kit
大鼠脑衍化神经营养因子(rat BDNF)Human RSPO1(R-spondin-1) ELISA Kit
Human RUVBL1(RuvB-like 1) ELISA Kit
大鼠骨成型蛋白-2(rat BMP-2)Human SAE1(SUMO-activating enzyme subunit 1) ELISA Kit
Human SIVA1(Apoptosis regulatory protein Siva) ELISA Kit
6T 200mg