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产品名称:猪脑微血管周细胞
组织来源:大脑
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
培养信息:
包被条件:PLL(0.1mg/ml)
培养基:基础培养基,含FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传3-5代左右;3代以内状态佳
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
猪脑微血管周体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
细胞简介:
猪脑微血管周分离自脑微血管;大脑分左右两个半球,大脑皮质(灰质)覆盖着每个大脑半球的大部分,它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。每一个半球都有三个面,即外侧面(约占整个皮质面积的1/3)、内侧面和底面(占2/3的面积);半球表面有很多深浅不等的沟或裂,沟或裂之间的隆起叫回,它们大大增加了大脑的表面积;大脑外侧面重要的沟、裂有大脑外侧裂、顶枕裂和中央沟。由于三沟裂之界隔,使大脑皮质组分为额叶、顶叶、颞叶、枕叶四大部分。周细胞(pericyte)又称Rouget细胞和壁细胞,是一种包围全身毛细血管和静脉中内皮细胞的细胞,可以收缩。周细胞嵌入毛细血管内皮细胞的基膜中,通过物理接触和旁分泌信号与内皮细胞进行细胞通讯,监视和稳定内皮细胞的成熟过程。此外,周细胞还具有调控毛细血管血流量、细胞碎屑清除和吞噬以及血脑屏障渗透性的作用,其多功能性是目前研究的热点之一,所以对血管周细胞的生物学特征、标记物、细胞功能等的研究都为相关研究提供基础资料。周细胞产生手指状的外延以调控毛细血管的血流量。周细胞和内皮细胞之间共同拥有一个基膜,基膜上有多种细胞连接,包括多种整合素、神经钙黏素、纤连蛋白以及接合素。它还参与毛细血管直径的双向调控;毛细血管受损时,周细胞还可增殖,分化为内皮细胞和成纤维细胞。
方法简介:
实验室分离的猪脑微血管周采用-胶原酶联合消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的猪脑微血管周经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养步骤:
一、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
二、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a)、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
b)、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的产品:
脂肪型脂肪酸结合蛋白 英文名称: fatty acid-binding protein 英文缩写: FABP4
凋亡相关因子Fas/Apo-1 英文名称: apoptosis-inducing factor Fas/Apo-1 英文缩写: Fas/Apo-1
凋亡相关因子配体 英文名称: apoptosis-inducing factor ligand 英文缩写: Fas-L
凋亡相关因子配体 英文名称: apoptosis-inducing factor ligand 英文缩写: Fas-L
FITC标记人CD64单克隆抗体
黑色素聚集激素/黑色素富集激素MCH抗体
PDCD1重组人 PD1 / PDCD1 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
D受体(VDR)重组蛋白 Recombinant Vitamin D Receptor (VDR)
NRG3重组人 NRG-3 / Neuregulin-3 蛋白 Protein
ACVR1B Protein Human 重组人 ALK4 / ACVR1B 蛋白 (His 标签)
HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/chicken/Egypt/2253-1/2006) 血凝素HA1 (H僀Ꝙ僀
D受体(VDR)重组蛋白 Recombinant Vitamin D Receptor (VDR)
ACVR1B Protein Human 重组人 ALK4 / ACVR1B 蛋白 (His 标签)
PDCD1重组人 PD1 / PDCD1 蛋白 (His & Fc 标签) Protein
HA Protein H5N1 重组甲型流感 H5N1 (A/chicken/Egypt/2253-1/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 标签)
NRG3重组人 NRG-3 / Neuregulin-3 蛋白 Protein
植物A(VA)ELISA 试剂盒
Human ai nuclear aibody (ANA) ELISA Kit 人抗核抗体(ANA)试剂盒
Porcineplateletactivatingfactor,PAFELISAKit 猪血小板活化因子(PAF)试剂盒分装
CLIAKitforaFGF-1(Humanacidicfibroblastgrowthfactor1)ELISAKit人酸性成纤维细胞生长因子1
血液血管紧张素Ⅰ转化酶1(ACE1)活性荧光共振能量转移法(FRET)定量试剂盒20次
MouseterminalcomplemecomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISAKit小鼠末端补体复合物C5b-9(TCCC5b-9)试剂盒
猪脑微血管周细胞小鼠αL岩藻糖苷酶(AFU)ELISA 试剂盒
Rat aquaporin 4 (AQP-4) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白4(AQP-4)试剂盒
Humanplacealprotein,PPELISAKit 人胎盘蛋白(PP)试剂盒分装
HumancicaicialPemphigoid,CP试剂盒人瘢痕性天疱疮抗体(CP)试剂盒
组(leucine)含量比色法定量试剂盒20次
humanS100calciumbindingproteinA9/calgranulinB,S100A9ELISAKit人S100钙结合蛋白A9/钙粒蛋白B(S100A9)试剂盒
收到细胞如何处理?
1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。若有,请拍照,并及时与技术支持联系(所拍照片将作为后续服务依据)。
2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4小时,以便稳定细胞状态。
3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比例、所需细胞因子、传代比例、换液频率等。
4、静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
5、贴壁细胞:若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。
6、悬浮细胞:将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%,可将细胞悬液分至2个细胞培养瓶内培养,补加培养基至5ml;若细胞密度未超过80%,将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右时再进行传代操作